淡紫灰链霉菌X33发酵产物的毒性试验评价.pdf

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1、江苏农业科学2015年第43卷第3期-——275I段栓成，张宇坤，吴晓玉，等．淡紫灰链霉菌X33发酵产物的毒性试验评价[J]．江苏农业科学，2015，43(3)：275—276doi：10．15889／j．issn．1002—1302．2015．03．090淡紫灰链霉菌X33发酵产物的毒性试验评价段栓成，张宇坤，吴晓玉，王园秀(江西农业大学生物科学与工程学院／江西省南昌市发酵应用技术重点实验室，江西南昌330045)摘要：利用小白鼠进行急性和亚急性经口毒性试验，研究抑制柑橘绿霉病菌的淡紫灰链霉菌菌株X33无菌发酵液对小鼠的毒性

2、，并测定小白鼠血常规指标，观测小鼠主要脏器。结果表明，菌株X33无菌发酵液的小鼠LD>10．0g／kg，受试物属于无毒级物质；小白鼠经28d喂养，各试验组小白鼠生长发育良好，体质量、食物利用率及血常规与对照组之间无显著差异；x~tJ,A鼠肝、肾、脾、胃、肠、十二指肠、睾丸(或卵巢)等主要脏器进行组织解剖，均未见病变。淡紫灰链霉菌菌株X33无菌发酵液对小鼠安全、无毒。关键词：淡紫灰链霉菌X33；无菌发酵液；毒性试验；小白鼠；血常规中图分类号：S182文献标志码：A文章编号：1002—1302(2015)03—0275—02柑橘采

3、后损失主要由霉菌、酵母菌、细菌等病原菌侵染造1．1．3试验动物及试剂远交昆明小鼠，自南昌大学医学院成，其中，柑橘青霉病和绿霉病是柑橘采后主要的两大贮藏病购买；所用试剂均为分析纯。害。据统计，由于青霉病和绿霉病感染导致的柑橘采后损失1．2方法率为30％一50％⋯。目前，柑橘采后病害主要使用化学药剂1．2．1急性经口毒性试验选用体质量为18—22g的小白进行防治，这容易污染环境，使病原菌产生抗药性，防病效果鼠20只，分2个试验组，每组雌雄各5只，采用一次性经口灌降低。此外，频繁和高浓度使用化学药剂，不仅会影响果胃方式，灌胃菌株X3

4、3无菌发酵液20mL／kg，剂量相当于实的自然风味和质构，果实表面还会存在残留，威胁消费者的10g／kg；另取10只小白鼠(雌雄各半)，给清水作为对照。小健康和安全。鼠首次饲喂时，隔夜空腹，禁食16h，仅喂水；试验前先正常饲生物防治是采用微生物菌株或抗生素类物质，通过喷洒喂3d，使其适应试验环境。灌胃后，连续14d观察小白鼠的或浸渍果实处理，以降低或防治果实采后病害的保鲜方法，高行为状况、中毒症状，记录各组实验小鼠死亡数，并及时剖检效、无毒、生产成本低廉，是未来的发展方向。江西南昌市并记录结果。发酵应用技术重点实验室以柑橘绿霉

5、病菌为靶标，开展菌株1．2．2亚急性经口毒性试验选小白鼠80只，随机分为4的分离和筛选研究，从土壤中分离筛选到1株淡紫灰链霉菌组，每组20只，雌雄各半。试验设灌胃菌株X33发酵液1、(Streptomyceslavendulae)，命名为淡紫灰链霉菌X33，其产生0．5、0．01kg共3个剂量组，以灌胃蒸馏水为对照组。每天的生物活性物质对柑橘绿霉病菌、柑橘青霉病菌、柑橘酸腐病观察并记录各组小白鼠的体征表现、行为、中毒症状和死亡情菌等多种病原菌均有较强的抑制活性，有望开发为新型的柑况。自由进食饮水，每周称量1次体质量，记录饮水量

6、、食橘采后防腐剂。本研究通过对淡紫灰链霉菌X33发酵液进物摄人量，计算食物利用率J。行毒理学试验，旨在探讨淡紫灰链霉菌X33发酵液的使用安1．2．3发酵液对小白鼠血常规指标和主要脏器的影响亚全性，为其进一步开发利用奠定基础。急性经口毒性试验结束，从每笼中随机抓取3只小白鼠，颈椎脱臼法处死，立即用注射器插入心脏采集血液，分析血液生化1材料与方法指标，并同时进行组织解剖检查。1．1材料2结果与分析1．1．1菌株淡紫灰链霉菌X33，由江西省南昌市发酵应用技术重点实验室分离得到。2．1急性经1：7毒性试验1．1．2受试物淡紫灰链霉菌X

7、33在28℃、200r／min下摇试验期问，各试验组小白鼠饮食和活动正常，生长发育良瓶发酵培养3d，发酵液经6000r／min离心10min，上清液用好，体质量有所增加，未见任何明显中毒表现，也无死亡；小白0．45m滤膜过滤，即得无菌发酵液。鼠喂养14d进行解剖，肉眼观察其心、肝、脾、肺、肾、肠等脏器，与对照组相比，皆未发现明显病变和差异。紫灰链霉菌收稿日期：2014—04—19X33无菌发酵液的饲喂剂量达10kg时不会引起小白鼠死基金项目：国家农业科技成果转化资金(编号：2011GB2C50017)；江亡，按现行2005年《

8、化学品毒性鉴定技术规范》急性经口毒西省教育厅科技落地计划；江西省赣鄱英才“555”工程。性试验的毒性分级标准划分，受检物属于无毒级物质。作者简介：段栓成(199O一)，男，硕士研究生，从事微生物资源利用研究。E—mail：shuanchenggO@126．tom。2．2亚急性