吸水链霉菌17997基因阻断变株发酵产物的hplc型分析

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1、第21分会场生物技术产业化421：=：==；；========2=======；。====；=#========≈========#======#。=====一质标准(5mg／L)f拘13倍。最低值也有20．8mg／L，也超过一般养虾池养鱼池的较高水平。根据我们调查，轮虫天然高产水域都是含有大量有机污染物的水域，这种水域大量的有机碎屑和细菌，是轮虫高产的饵料基础。(三)静水池塘和半循环水池塘的比较单从静水池塘(18池)和半循环水池塘(68池)的水化学指标来比较分析，看不出有明显的区别，不论是随时间的变化趋势还是绝对含量都很相近。但半循环水池塘在轮虫高峰期El平均产轮虫量(165kg

2、·hm2d一1)明显高于静水池(52kg·hm屯d1)。分析其原因，半循环水池具有如下优点：加注富含单胞藻的新水，可供给轮虫饵料，提高水中溶氧，同时吸收部分轮虫的代谢产物；排出老水，可减轻代谢产物对轮虫的压力。这样较好地处理了浮游植物与轮虫之间的关系：既保持池中有一定量的浮游植物，有较强的供饵能力，又保证轮虫具有一定的现存量，使它们尽量维持高水平上的平衡，延长轮虫的高峰期，提高产量。而静水池由于饵料缺乏，轮虫代谢产物积累等问题，产量和高峰期持续时间明显低于半循环水培养池。而且池水长期静止，能使水分子链结构变长，水活力变差，动植物体新陈代谢减弱，影响生长发育。参考文献1金送笛．哈尔滨

3、地区高产鱼池水质研究(一)：水化学与初级生产力．大连水产学院学报，1984(1)：1～132林荣根．虾池水体的富营养化及防治对策．海洋学报，1997，19(6)：127～1333王崇明．对虾池塘浮游植物与主要水质因子的关系．海洋科学，1993(4)：10～124王金秋．pH值对萼花臂尾轮虫种群增长及繁殖的影响．应用生态学报，1997，8(4)：435～4385杨逸萍．精养虾池主要水化学因子变化规律和氮的收支‘．海洋科学，1999(1)：15～176臧维玲．中国对虾池溶解氧的收支平衡状态．海洋学报，1995，17(4)：137～1417张文明．年轻之水——活水对生物及水产养殖的影响．

4、水产养殖，1996(3)：25～26作者简介窦亚秋，盘锦市水产学会会员，高工，中国海洋大学农业推广硕士在读。电话：0427—2288390，传真：0427—2822601；E—mail：douyaqiu2004@163．corn。吸水链霉菌17997基因阻断变株发酵产物的HPLC型分析李京艳赫卫清杜煜武临专高群杰孙桂芝王以光中国医学科学院医药生物技术研究所，北京，100050摘要以吸水链霉菌17997为出发菌株，分别阻断其基因簇中与格尔德霉素(GA)起始单位生物合成相关的3一氯基5．羟基苯甲酸(AHBA)合酶基因及与之相连的PKS，并阻断含GA聚酮体后修饰基因-氨甲酰基转移酶基因的

5、PKS基因，分别得到3个变株AHBA—gdn，AH。BA—shn和CT—PKS基因阻断变株。变株发酵产物经乙酸乙酯提取和HPLC分析，表明AHBA—gdn和CT—PKS基因簇与GA生物合成相关，AHBA—shn基因簇可能编码另一个安莎类化合物。同时还发现一些变株产生的可能为新的化合物。本研究表明采用反相HPLC梯度洗脱系统可以最大限度的呈现基因阻断株发酵代谢产物的变化，根据HPLC中新出现的422以科学发展观促进科技创新(下)吸收峰可以跟踪不同基因阻断株产生的新产物，为化学鉴剐工作提供方向。关键词微生物药物学吸水链霉菌1799基因阻断HPLC吸水链霉菌17997是从我国土壤中分离得

6、到，经鉴定它可以产生格尔德霉素(geldanamycin，GA)。GA是一种苯醌安莎类的抗生素，具有抑制肿瘤细胞和广谱抗病毒的作用。近年来证实GA可以特异抑制热休克蛋白90(heatshockprotein90，Hsp90)，从而间接地干扰细胞信号蛋白的功能。GA化学修饰的衍生物17烯丙氨基格尔德霉素美国已进入Ⅱ期临床研究。本所病毒研究室还发现GA具有广谱抗病毒活性。为了获得GA生物合成基因以便为其基因工程改造打下基础，我们利用与GA生物合成相关基因，如3一氨基一5羟基苯甲酸(AHBA合酶)、聚酮合酶(PKS)和氨甲酰基转移酶(CT)等基因序列设计引物，以它们的PCR产物作为探针，

7、从构建的吸水链霉菌17997基因文库中获得与GA生物合成相关基因。在用AHBA作为探针时，我们从吸水链霉菌17997基因库中发现了两组含AHBA基因并与之相连的PKS基因簇，命名为AHBA—gdn和AHBA—shn。以CT为探针也获得了与GA生物合成相关的PKS和PKS后修饰基因簇，命名为CT—PKS。本文报道以基因阻断技术获得三个基因簇阻断变株，并以HPLC分析三种变株发酵产物的谱型，以此推断它们与GA生物合成的关系，并发现变株产生的可能为新的化合物。在一菌产生多种