DNA粗萃取一、实验目的从实验中了解DNA粗萃取的基本原理.doc

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1、＜DNA粗萃取＞一、實驗目的：從實驗中了解DNA粗萃取的基本原理，以及學習簡單萃取生物DNA的基本技巧。二、實驗原理：因為DNA在食鹽水溶液中的溶解度會隨著濃度的變化而改變，當食鹽水濃度為0.14M時，DNA不溶於酒精，但是細胞中的某些物質(例如:細胞膜、蛋白質等)則可以溶於酒精溶液。利用此原理，可以將DNA與其他非DNA的物質分離，而更進一步純化出含雜質較少的DNA。三、實驗材料：1.生物細胞(唾液、水果或其他生物組織…)2.嫩精(或其他含有蛋白酶的物質，ex.鳳梨汁)3.清潔劑(含有sodiumlaurylsulfate，大部分清潔劑都有)4.濃食鹽

2、水(5M)※如何調配？5.冰酒精(95%)、酒精(70%)※如何以95%酒精調配出70%酒精？6.紗布7.燒杯8.攪拌棒9.量筒10.滴管四、實驗步驟：(一)人體DNA萃取<步驟1>調配緩衝液：取100ml的食鹽水(5M)加入一些清潔劑和嫩精。<步驟2>取下口腔皮膜細胞：取10ml的水漱口1～2分鐘，吐在燒杯裡。<步驟3>純化DNA：將潄口水加入20ml的緩衝液，輕輕攪拌2分鐘。<步驟4>析出DNA：用滴管吸取95%的冰酒精從杯壁慢慢加入杯中（不要攪拌），酒精會浮在上層，此時，在兩層的交界處會出現如棉絮般的白色物質，即為DNA。<步驟5>取出DNA：以玻

3、棒將DNA捲起，或滴管將DNA吸起，放入70%的酒精中保存。(二)水果DNA萃取<步驟1>製備果汁：將去皮水果放入果汁機打碎，放入燒杯中再加入100ml的水。<步驟2>溶解染色體：加入2.5ml的清潔劑，攪拌均勻約3分鐘。<步驟3>純化DNA：(1)加入5ml的5M濃食鹽水，並攪拌5分鐘。(2)加入嫰精水溶液5ml，持續攪拌至少5分鐘。※切記，攪拌過程不可太快，攪拌的方向也不要改變，否則容易破壞DNA的結構，如此就不容易蒐集到較長的DNA了。<步驟4>收集DNA濾液：燒杯中的混合液以雙層紗布過濾，收集濾液(約15ml)。<步驟5>析出DNA：用滴管吸取9

4、5%的冰酒精從杯壁慢慢加入杯中（不要攪拌），酒精會浮在上層，此時，在兩層的交界處會出現如棉絮般的白色物質，即為DNA。<步驟6>取出DNA：以玻棒將DNA捲起，或滴管將DNA吸起，放入70%的酒精中保存。一、問題討論：1.<步驟2>中，加入清潔劑的目的為何？2.<步驟3>中，加入濃食鹽水(5M)的目的為何？3.<步驟3>中，加入嫩精水溶液的目的為何？4.<步驟10>取出的DNA是否完全是人類的DNA？