马尾藻多糖的膜分离纯化.doc

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1、马尾藻多糖的膜分离纯化　　摘要：对膜分离技术分级分离马尾藻多糖提取液进行了研究，比较了不同料液比及操作压力对多糖分级分离的影响，结果表明，多糖主要包含在分子量大于５０ｋＤ的截流液中；随着料液比的减小，膜分离后的多糖损失减少，确定最佳料液比为１∶１５０；操作压力对多糖损失无显著影响，在设备允许压力范围内，０．１～０．５ＭＰａ都适合。　　关键词：马尾藻；多糖；膜分离　　中图分类号：Ｓ９８５．４＋９；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11402－0375-03　　　　ＳｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｆｒｏｍＳａｒｇａｓｓｕｍｐａｌｌｉ

2、ｄｕｍｂｙＭｅｍｂｒａｎｅTｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　　　　ＹＥＨｏｎｇ１，ＺＨＯＵＣｈｕｎ－ｈｏｎｇ２，ＺＥＮＧＸｉａｏ－ｘｉｏｎｇ１，ＳＵＮＹｉ１，ＨＵＡＮＧＣｈｅｎ－ｃｏｎｇ１　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＦｒａｃｔｉｏｎａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍＳａｒｇａｓｓｕｍｐａｌｌｉｄｕｍｂｙｍｅｍｂｒａｎｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｈａｓｂｅｅｎｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏａｎｄｏｐｅｒａｔｉｎｇｐｒｅｓｓｕｒｅｏｎｆｒａｃｔｉｏｎａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗｅｒｅｉｎ

3、ｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＳ．ｐａｌｌｉｄｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗｅｒｅｍａｉｎｌｙｉｎｃｌｕｄｅｄｉｎｔｈｅｆｒａｃｔｉｏｎｓｗｈｏｓｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｗａｓｂｉｇｇｅｒｔｈａｎ５０ｋＤ．Ａｈｉｇｈｅｒsolid-liquidｒａｔｉｏｗｏｕｌｄｌｅａｄｔｏｌｅｓｓｌｏｓｓｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｉｎｍｅｍｂｒａｎｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎ．Ｉｔｗａｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｓｕｉｔａｂｌｅｔｏｄｉｌｕｔｅｔｈｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｔｔｈｅｒａｔｉｏｏｆ１∶１５０ｂｅｆｏｒｅｍｅｍｂｒａｎｅｓｅｐａｒ

4、ａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｏｐｅｒａｔｉｎｇｐｒｅｓｓｕｒｅｈａｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｏｎｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｌｏｓｓ．Ｓｏｔｈｅｐｒｅｓｓｕｒｅｏｆ０．１～０．５ＭＰａｗasｓｕｉｔａｂｌｅａｓｌｏｎｇａｓｉｔwaｓｉｎｔｈｅａｌｌｏｗａｂｌｅｓｃｏｐｅｏｆｍｅｍｂｒａｎｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｅｑｕｉｐｍｅｎｔ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓａｒｇａｓｓｕｍｐａｌｌｉｄｕｍ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｍｅｍｂｒａｎｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　　　　海洋生物多糖具有多种药用功效，可能成为人类战胜疾病，尤其是肿瘤、心脑血管疾病、艾滋病三大疑难病症的重

5、要物质［１］。马尾藻盛产于我国黄海、渤海沿岸各地，是一种常见的藻类，产量很大，从马尾藻中提取有价值的多糖，对海洋生物制药具有重大意义。海藻多糖的分离纯化是海藻多糖研究的重要步骤，海藻多糖是一类组成相当复杂的生物大分子，使用膜分离技术对海藻多糖进行分级可达到初步纯化的目的。膜分离具有无相变及化学变化、可常温操作、选择性高与能耗低等优点［２－４］。对膜分离技术分级分离马尾藻多糖提取液进行了研究，比较了不同料液比及操作压力对多糖分级分离的影响，以改善提取过程，提高多糖得率。　　１材料与方法　　１．１材料　　１．１．１马尾藻试验用马尾藻取自山东，经超临界ＣＯ２萃取预处理。

6、　　１．１．２试剂三氯乙酸、葡萄糖、苯酚、浓硫酸、无水乙醇等，均为国产分析纯。　　１．１．３仪器电子天平ＢＳ２１０Ｓ，北京塞多利斯仪器系统有限公司；超声波细胞粉碎机ＪＹ９８－Ⅲ，上海新芝生物技术研究所；脂肪测定仪，上海新嘉电子有限公司；数显恒温水浴锅ＨＨ－６，国华电器有限公司；旋转蒸发仪，Ｈｅｉｄｏｌｐｈ公司；台式离心机ＡｎｋｅＴＤＬ－５，上海安亭科学仪器厂；可见分光光度计７２２Ｓ，上海精密科学仪器有限公司；超滤设备，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ；冷冻干燥机Ａｌｐｈａ１－２，Ｍａｒｔｉｎ。　　１．２方法　　１．２．１试验流程称取马尾藻，加适量去离子水，超声波细胞破碎，热水浸

7、提［５－８］，离心取上清液，加三氯乙酸沉淀蛋白质，离心取上清液，用膜过滤，将各分子量范围的溶液分别浓缩，加无水乙醇至体积分数为７５％，离心取沉淀，冷冻干燥得各粗多糖组分。　　１．２．２多糖测定多糖测定采用苯酚－硫酸法［９］。准确称取１０５℃干燥至恒重的葡萄糖标准品５００ｍｇ，用去离子水定容至１００ｍＬ，再取出１ｍＬ用去离子水定容至１００ｍＬ，摇匀，得５０μｇ／ｍＬ葡萄糖标准溶液。准确吸取０．２０、０．４０、０．６０、０．８０、１．００ｍＬ上述溶液，加入具塞试管，补水至２．０ｍＬ，准确加入６％重蒸苯酚溶液１．０ｍＬ，迅速加入浓硫酸５．０ｍＬ，盖塞，摇匀，静置１５ｍｉ

8、ｎ后，置沸