半叶马尾藻多糖对hl论文

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1、半叶马尾藻多糖对HL论文唐慎华贾秀红朱淑霞李建厂陆羡【关键词】半叶马尾藻多糖；HL【摘要】目的探讨半叶马尾藻多糖对HL60细胞CD11b、CD11a表达的影响。方法MTT研究半叶马尾藻多糖对HL60细胞体外增殖的影响，采用流式细胞术研究对CD11b、CD11a表达的影响。结果半叶马尾藻多糖能增高CD11b、CD11a的表达率，且作用随时间和浓度的增加而增强。结论半叶马尾藻多糖在体外可影响HL60细胞CD11b、CD11a的表达，提示其在抗肿瘤方面有一定的开发应用前景。【关键词】半叶马尾藻多糖；HL60细胞；CD11

2、b；CD11a【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectofseaSargassumconfusumontheexpressionofCD11bandCD11ainHL60cell.MethodTheMTTandFCMapproachesedependentmanner.ConslusionTheseaiadrug.【KeySargassumconfusum,SP）研究其对HL60细胞CD11b、CD11a表达的影响。1材料与方法1.1药物与试剂SP（广东医学院刘秋英硕士惠赠），RP

3、MI1640培养基（GibcoCo,USA），FITC标记的鼠抗人CD11a单克隆抗体（ExalphaBiologicalsInc,USA），FITC标记的鼠抗人CD11b单克隆抗体（ExalphaBiologicalsInc,USA），FITC标记的非特异鼠抗人IgG2a（ExalphaBiologicalsInc,USA）。1.2主要仪器OLYMPUSIMTI型倒置相差显微镜（Japan），EPICSXL流式细胞仪（CoulterCo,USA），丹尼酶标仪（MK3）(Denmark)，SI1640液体培养体系，

4、置37℃、5%CO2恒温培养箱中培养，隔天换液一次。实验选用对数生长期细胞。1.3.2MTT抑制实验：参照文献［1，2］，将细胞以2×105/ml密度接种于96孔培养板中，加入不同浓度的SP，置37℃、5%CO2孵箱中分别培养24、48、72h后，每孔加入MTT（5mg/ml）20μl,继续培养4h，加入MTT裂解液（20%SDS+50%DMF+30%H2O）100μl，37℃、5%CO2孵箱中孵育8h，酶标仪检测各组细胞的A630/A570值，计算抑制率(IR)。抑制率（IR）＝（1－用药组A值/对照组A值）×1

5、00%。1.3.3FCM检测CD11b、CD11a的表达：取药物处理后的细胞悬液1000r/min离心5min，PBS洗涤2次，并用PBS重悬细胞，调整细胞数为1×106/ml，取100μl细胞悬液，加入10μlCD11b单克隆抗体和10μlCD11a单克隆抗体；另取100μl细胞悬液，加入10μlIgG2a作阴性对照，4℃避光孵育30min，PBS洗涤2次，200目尼龙网过滤，上机检测。1.3.4统计处理：实验数据用x±s表示，使用SPSS11.5统计软件进行统计描述，采用单因素方差分析（OneTT结果以不同浓度

6、（0、50、100、200、400、800μg/ml）的SP作用于HL60细胞24、48、72h，用MTT法检测其对HL60细胞增殖的影响，如表1，图1、2所示，随着SP浓度的增加和作用时间的延长，抑制率逐渐增加。当浓度为800μg/ml，作用48h时抑制率为（5130±310）%，与对照组相比差异有显著性（P001）。其24、48、72h的IC50为（77678±2830）μg/ml、（50897±2208）μg/ml、（35567±1023）μg/ml。表1SP对HL60细胞增殖的抑制作用（略）注：与0μg/m

7、l组相比◇P005，◆P001；*F=156214，**F=47032,***F=109831图1抑制作用的剂效曲线（略）图2抑制作用的时效曲线(略)2.2CD11b、CD11a的表达结果如表2、3所示，随着药物浓度及作用时间的增加，CD11a、CD11b表达逐渐上升。表2SP对HL60细胞CD11a表达的影响（略）注：与0μg/ml组相比△P005，◆P001；与300μg/ml组相比▲P001，与500μg/ml组相比★P001表3SP对HL60细胞CD11b表达的影响（略）注：与0μg/ml组相比◇P005，

8、◆P001；*F=21533，**F=26044，***F=366073讨论白血病是人群发病率较高的恶性肿瘤之一，化疗是重要的治疗手段，但其副作用是几乎不可克服的缺点。在祖国医学中，中草药在抗肿瘤中的应用源远流长，如马尾藻等治疗乳腺癌和子宫癌。现代研究证明近100种中药多糖具有不同程度的抗肿瘤作用。我们的研究结果表明，SP对HL60细胞增殖呈明显抑制作用，且