超临界流体萃取甘草中角鲨烯的方法研究.doc

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1、超临界流体萃取甘草中角鲨烯的方法研究　　摘要：采用超临界流体萃取技术提取甘草中的角鲨烯，并用高效液相色谱法测定其含量。结果显示，在丙酮为夹带剂的萃取产物中角鲨烯含量高达０．４７％，超临界流体萃取法对甘草角鲨烯的总提取率为０．０１８％，高于传统索氏提取法及超声辅助提取法所得提取率。　　关键词：超临界流体萃取；甘草；角鲨烯；高效液相色谱法　　中图分类号：Ｑ９４６．４；R284.2文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11417－3600-02　　　　ＳｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＦｌｕｉｄＭｅｔｈｏｄｆｏｒＥｘｔｒａｃｔｉｎｇＳｑｕａｌｅｎｅｆｒｏｍＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ

2、ｕｒａｌｅｎｓｉｓ　　　　ＧＡＯＧｕｉ－ｔａｏ１，ＹＡＮＧＭｉｎ－ｌｉ１，ＬＩＡＮＧＸｉｎ－ｈｕａ２　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＳｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌｆｌｕｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗａｓｕｓｅｄｔｏｅｘｔｒａｃｔｓｑｕａｌｅｎｅｆｒｏｍＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓ；ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣ．Ｔｈｅcontentｏｆｓｑｕａｌｅｎｅｒｅａｃｈｅｄｕｐｔｏ０．４７％ｗｈｅｎａｃｅｔｏｎｅｗａｓｕｓｅｄａｓｍｏｄｉｆｉｅｒ；ａｎｄｔｈｅｔｏｔａｌｙｉｅｌｄｒｅａｃｈｅｄ０．０１８％．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗ

3、ｅｄｔｈａｔｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌfluidｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｈａｄａｄｖａｎｔａｇｅｏｖｅｒｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＳｏｘｈｌｅｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｓｑｕａｌｅｎｅｆｒｏｍＧ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌｆｌｕｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓ；ｓｑｕａｌｅｎｅ；ＨＰＬＣ　　　　豆科植物甘草以根和根状茎入药，具有益气补中，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和药性之功能，入列卫生部公布的药食两用名单，具有很好的食用和药用开发

4、价值。角鲨烯是一种脂质不皂化物，具有抗肿瘤、抑制心血管疾病和增强免疫力的功能，在食品、保健品等行业已有广泛应用［１，２］，已有研究报道甘草中含有高活性成分角鲨烯［３］。超临界流体萃取是近代化工分离中出现的高新技术，超临界流体综合了液体和气体的优点，具有许多独特的性质，如黏度小，密度、扩散系数、溶剂化能力等指标随温度和压力变化十分敏感，可以低温提取和高选择性分离等，特别适合于分离、精制低挥发性和热敏性的物质［４］。本实验建立了利用ＳＦＥ技术分离甘草中角鲨烯的方法，以期为甘草的综合开发与利用提供一定的技术参考。　　１材料和方法　　１．１材料、试剂及仪器　　材料：甘草

5、采自宁夏盐池，经自然阴干，粉碎，过４０目筛。试剂：角鲨烯标品，纯度９８％；其他试剂如乙醇、丙酮等均为分析纯。仪器：ＨＡ２２０－５０－０６型超临界萃取装置，Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪，ＲＥ－５２Ｂ型旋转蒸发器，ＡＬ２０４电子分析天平。　　１．２实验方法　　１．２．１标准曲线的绘制准确配制０．５０ｍｇ／ｍＬ的角鲨烯标准溶液，精确吸取该溶液１．０、２．０、３．０、４．０、５．０ｍＬ于１０ｍＬ容量瓶中，用氯仿定容至刻度，摇匀后分别进行ＨＰＬＣ测定，以峰面积Ｙ对进样浓度Ｘ作角鲨烯标准曲线，得回归方程为Ｙ＝　　３５５８９Ｘ，Ｒ２＝０．９９９１。　　１．２．２甘草角

6、鲨烯的提取①提取流程：取甘草粉装入１Ｌ萃取釜中，安装好设备，按萃取工艺设定实验参数进行萃取，以２００ｍＬ丙酮为夹带剂萃取２ｈ，至分离釜无萃取物流出；换用２００ｍＬ９５％乙醇为夹带剂，继续萃取２ｈ。分别接取两次的萃取物，旋转蒸发除去溶剂及夹带剂，精密称取一定量萃取物，氯仿溶解定容，ＨＰＬＣ检测。②超临界流体萃取条件：萃取压力３５ＭＰａ，萃取温度４０℃，分离Ⅰ温度４０℃，分离Ⅱ温度３０℃，ＣＯ２流量为３０Ｌ／ｈ，分离Ⅰ压力８ＭＰａ，分离Ⅱ压力５ＭＰａ。　　１．２．３高效液相色谱分析条件色谱柱：ＯＤＳ２Ｃ１８柱；检测波长：２１０ｎｍ；流动相：甲醇－乙腈；流速：１．０ｍ

7、Ｌ／ｍｉｎ；柱温：２０℃。在此条件下，角鲨烯标品的保留时间为１７．６０ｍｉｎ。提取率计算公式为：　　提取率＝×１００％　　２实验结果　　萃取物的色谱图如图２所示，甘草粉２７０ｇ经超临界ＣＯ２－丙酮萃取至分离釜无产物流出，得萃取物５．４７ｇ，其中角鲨烯含量０．４７％；继续加入９５％乙醇作夹带剂，得萃取物１５．８１ｇ，角鲨烯含量０．１４％。经超临界萃取，甘草角鲨烯总提取率为０．０１８％。　　３讨论　　３．１超临界萃取技术对角鲨烯的提取率　　索氏提取法和超声波辅助提取法对甘草角鲨烯的提取率分别为０．０００９％和０．００１１％［5］，相比较而言，超临界萃取技术对角鲨烯提

8、取率高，且在丙酮为夹带剂