热水浸提法提取铁皮石斛原球茎多糖的工艺.doc

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1、热水浸提法提取铁皮石斛原球茎多糖的工艺　　摘要：利用正交试验对铁皮石斛原球茎多糖提取的工艺条件进行优化，考察料水质量比、浸提温度、浸提时间和浸提次数４个因素对铁皮石斛原球茎多糖得率的影响。结果表明，铁皮石斛原球茎多糖的最佳提取工艺为浸提次数４次，浸提时间３ｈ，料水质量比１∶６０，浸提温度８０℃，多糖得率为９．１７％。在４个提取因素中，对铁皮石斛原球茎多糖提取影响最大的因素是浸提次数，其次是浸提时间，料水质量比和浸提温度影响都比较小，其中浸提次数不同水平间呈极显著差异，浸提时间、料水质量比和浸提温度对铁皮石斛原球茎多

2、糖提取率影响不显著。　　关键词：铁皮石斛；原球茎；多糖；提取工艺　　中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11418－3807-04　　　　HotWaterExtractionTechnologyforPolysaccharidesfromProtocormsof　　Dendrobiumcandidum　　　　ＣＥＮＺｈｏｎｇ－ｙｏｎｇ，ＳＵＪｉａｎｇ，ＬＩＡＮＧＧｕａｎ－ｘｉｎｇ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｒａｔｉｏｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍｔｏ

3、ｗａｔｅｒ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅandｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓｏｎｔｈｅｅｘｔｒａｔｉｏｎｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｏｇｅｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅsｆｒｏｍｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍｂｙｈｏｔｗａｔｅｒ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓａｓｆｏｌｌｏｗｓ：TｈｅｒａｔｉｏｏｆＤ

4、ｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍｔｏｗａｔｅｒ１∶６０，ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｆｏｕｒｔｉｍｅｓａｔ８０℃ｆｏｒ３ｈ．Ｉｎｔｈｉｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅsｗａｓ９．１７％．Ａｍｏｎｇｔｈｅｆｏｕｒｆａｃｔｏｒｓ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓｗａｓｔｈｅｍｏｓｔｉｎｆｌｕｅｎｔｉａｌｆａｃｔｏｒ，ｔｈｅｎｅｘｔｗａｓｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ．ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｒａｔｉｏｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍｔｏｗａｔｅｒａｎｄｔ

5、ｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗereｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｌｅｓｓ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓｏｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ，ｗｈｉｌｅｔｈａｔｏｆｏｔｈｅｒｆａｃｔｏｒｓｗｅｒｅｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍ；ｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　　　　铁皮石斛属于兰科石斛属，其主要药效成分为多糖，具有较强的抗肿瘤、

6、增强免疫功能活性、清胃热、助消化等功能，铁皮石斛作为传统的中药材，其价值已被世人所公认和推崇［１－７］。铁皮石斛的种子极小、无胚乳，自然条件下需与某些真菌共生才能萌发，很难用实生苗栽培，而传统的分株、扦插等方式的繁殖率极低，加上人为的过度采挖和破坏生境，野生铁皮石斛濒临灭绝［８，９］。为保护珍贵野生资源和满足市场需求，采用组织培养与快速繁殖技术获得铁皮石斛成为一种科学的解决方案。目前，铁皮石斛试管苗的繁殖一般要经过原球茎阶段，而类原球茎实质上是正在生长分化的体细胞胚胎，具有植株同样的物质代谢和形态发育的潜能。目前，

7、利用组织培养技术诱导铁皮石斛原球茎已获得成功，使用原球茎代替全植株作为药源成为可能。　　由于多糖是铁皮石斛的主要药用成分，因此，多糖的提取是人们利用铁皮石斛的重要环节之一。为了进一步探索铁皮石斛多糖提取的方法，充分发挥铁皮石斛的作用，研究了热水浸提法在铁皮石斛原球茎多糖提取中应用的可行性，考察影响提取的主要因素，寻求最佳的提取工艺条件，为研究铁皮石斛原球茎多糖及其药理作用提供理论依据。　　１材料与方法　　１．１材料　　原料：取培养于１／２ＭＳ固体培养基的铁皮石斛原球茎，先在１０５℃干燥箱中烘２０～３０ｍｉｎ，再于６

8、０～８０℃烘干后，经粉碎、干燥恒重处理后备用。　　试剂：苯酚、浓硫酸、８０％乙醇和９５％乙醇、石油醚、葡萄糖。　　仪器：ＵＶ－１８００型分光光度计，索氏提取器，ＨＨ－６恒温水浴锅，ＡＥ２４０Ｓ型电子分析天平［梅特勒－托利多仪器有限公司］，旋转蒸发器ＲＥ－５２ＡＡ。　　１．２试验方法　　１．２．１标准曲线的制作准确称取１００ｍｇ葡萄糖，以去离子水溶解并定容至１