大肠杆菌感染对家蝇幼虫ACP-POD活性的影响.doc

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1、大肠杆菌感染对家蝇幼虫ACPPOD活性的影响　　摘要：观察家蝇三龄幼虫针刺感染大肠杆菌后４、８、１２、１６ｈ血清和血细胞中酸性磷酸酶、过氧化物酶活性的变化。结果表明，大肠杆菌感染后各时间组家蝇三龄幼虫血清和血细胞中ＡＣＰ活性显著高于对照组。其中血清和血细胞中ＡＣＰ活性分别在感染８ｈ、４ｈ达高峰，然后逐渐下降；大肠杆菌感染后各时间组家蝇三龄幼虫血清和血细胞中ＰＯＤ活性显著高于对照组。其中血清和血细胞中ＰＯＤ活性分别在感染１２ｈ、８ｈ达高峰，然后逐渐下降。大肠杆菌感染后家蝇三龄幼虫血清和血细胞中ＡＣＰ、ＰＯＤ活性均增强，

2、提示这两种酶在防御微生物感染过程中发挥了重要作用。　　关键词：家蝇幼虫；大肠杆菌；血清；血细胞；酶活性　　中图分类号：Ｒ３８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11421－4396-03　　　　ＴｈｅＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＩｎｆｅｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡＣＰａｎｄＰＯＤｉｎ　　ＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａＬａｒｖａe　　　　ＹＡＮＲｏｎｇ，ＬＩＵＬｉｕ，ＬＩＵＨｕｉ，ＨＥＬｉ－ｆａｎｇ，ＧＡＯＬｕ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃ

3、ｅｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｗｏkindsofｅｎｚｙｍｅｉｎｓｅｒｕｍａｎｄｈｅｍｏｃｙｔｅｏｆＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｌａｒｖａe，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｉｎｔｈｅ３ｒｄｓｔａｇｅｌａｒｖａeｏｆＭ．ｄｏｍｅｓｔｉｃａｉｎｆｅｃｔｅｄｂｙＥ．ｃｏｌｉｆｏｒ４，８，１２ａｎｄ１６ｈweredeterminedｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＲｅｓｕｌｔｓshowedthattheａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡＣ

4、Ｐｉｎｓｅｒｕｍａｎｄｈｅｍｏｃｙｔｅｗｅｒｅａｌｌｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌａｆｔｅｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎｆｏｒ４，８，１２ａｎｄ１６ｈ；Tｈｅｐｅａｋｏｆｔｈｅｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｓｅｒｕｍａｎｄｈｅｍｏｃｙｔｅｗｅｒｅａｔ８ｈａｎｄ４ｈａｆｔｅｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｎｉｔｇｒａｄｕａｌｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄ．ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＰＯＤｉｎｓｅｒｕｍａｎｄｈｅｍｏｃｙｔｅｗｅｒｅａｌｌｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈ

5、ｅｃｏｎｔｒｏｌａｆｔｅｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎｆｏｒ４，８，１２ａｎｄ１６ｈ.Aｎｄｔｈｅｐｅａｋｏｆｔｈｅｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｓｅｒｕｍａｎｄｈｅｍｏｃｙｔｅｗｅｒｅａｔ１２ｈａｎｄ８ｈａｆｔｅｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ａｎｄｔｈｅｎｉｔｇｒａｄｕａｌｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄ．ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＡＣＰａｎｄＰＯＤｉｎｓｅｒｕｍａｎｄｈｅｍｏｃｙｔｅｏｆｔｈｅ３ｒｄｓｔａｇｅｌａｒｖａeｏｆＭ．ｄｏｍｅｓｔｉｃａｅｎｈａｎｃｅｄａｆｔｅｒｉｎｆｅｃｔｅｄｂｙＥ．ｃｏｌｉ，sug

6、gestingｔｈａｔtheｔｗｏｅｎｚｙｍｅｓｐｌａｙｅｄｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅsｉｎｔｈｅdefenseｏｆｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．　　Ｋｅｙwｏｒｄｓ：Ｍｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｌａｒｖａe；Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ；ｓｅｒｕｍ；ｈｅｍｏｃｙｔｅ；ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｅｎｚｙｍｅ　　　　昆虫缺乏特异性免疫作用，主要依靠细胞免疫和体液免疫来完成免疫防御。昆虫血细胞的免疫作用不仅表现为对异物的吞噬、形成结节或包囊杀死等过程［１］，在其吞噬前、吞噬过程中和吞噬后，血细胞还以脱颗粒的方式

7、释放多种水解酶、抗氧化酶等，在昆虫免疫中具有重要作用。以前的研究发现家蝇幼虫感染大肠杆菌后血细胞总数增加、浆血胞和粒血胞参与感染后的免疫［２］，同时感染后家蝇幼虫血清中酸性磷酸酶活性增强，但感染后血清中ＡＣＰ的活性增强是否由血细胞释放参与家蝇幼虫免疫尚不清楚。本实验对大肠杆菌感染后的家蝇三龄幼虫血细胞中ＡＣＰ的酶活性变化进行测定，并对昆虫体内重要的抗氧化酶ＰＯＤ的活性变化进行研究，观察外源微生物入侵对这两种酶活性的影响，以期为其免疫功能及作用机制研究提供参考资料。　　１材料与方法　　１．１材料与仪器　　１．１．１家蝇虫

8、源由贵阳医学院吴建伟教授惠赠。　　１．１．２大肠杆菌４４１８４遵义医学院微生物学教研室惠赠。　　１．１．３试剂酸性磷酸酶试剂盒、过氧化物酶试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品。　　１．１．４仪器细胞超声粉碎仪；Ｕ－３０１０紫外分光光度计。　　１．２方法　　１．２．１家蝇三龄幼虫饲养参照文献［３］的方法饲养家蝇幼虫至孵化后第４天备用