中华条颈龟胚胎期性腺分化的组织学观察.doc

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1、中华条颈龟胚胎期性腺分化的组织学观察　　摘要：采用石蜡组织切片和ＨＥ染色法，观察了在２９℃下中华条颈龟受精卵孵化胚胎期的性腺发育，并研究了其性别分化的过程。结果发现，沃尔夫管的发育早于缪勒氏管，从胚胎发育第１９天起，单层缪勒氏管管壁细胞开始分裂增殖，随着胚胎的发育，管壁分化出黏膜层、黏膜下层和浆膜层，发育趋于完整；沃尔夫管发育停滞，萎缩退化。在胚胎发育第１９天，性腺开始观察到少量卵原细胞和卵巢腔，分化完成时间为第２５天，发育为卵巢。结果表明，胚胎期第１９～２５天为性别决定的关键时期，缪勒氏管的发育与卵巢分化具有同步性。　　关键词：中华条颈龟；性别分化；缪勒氏管

2、；沃尔夫管；卵巢　　中图分类号：Ｑ９５４．４；Q959.6+3文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11417－3591-03　　　　ＧｏｎａｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔinｔｈｅＥｍｂｒｙｏｎｉｃＰｅｒｉｏｄｉｎｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＳｔｒｉｐｅｄ－ｎｅｃｋＴｕｒｔｌｅ，Ｍａｕｒｅｍｙｓｓｉｎｅｎｓｉｓ　　　　ＦＵＬｉ－rｏｎｇ，ＨＥＢｉｎ，ＬＩＡＯＧｕａｎｇ－qｉａｏ，ＹＡＮＬｉａｎ，ＳＨＩＨａｉ－tａｏ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇｔｈｅｐａｒａｆｆｉｎ－ｅｍｂｅｄｄｅｄｓｅｃｔｉｏｎｓａｎｄＨＥｓｔａｉｎing，ｇｏｎａｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄ

3、ｓｅｘｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＭａｕｒｅｍｙｓｓｉｎｅｎｓｉｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎ２９℃．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗedｔｈａｔｔｈｅＷｏｌｆｆｉａｎｄｕｃｔｄｅｖｅｌｏｐｅｄearlierthanｔｈｅＭüｌｌｅｒｉａｎｄｕｃｔ．ＴｈｅＭüｌｌｅｒｉａｎｄｕｃｔｗａｌｌｃｅｌｌｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｅｄｂｅｇｉｎｎｉｎｇａｔｔｈｅ１９thｄａｙａｆｔｅｒｔｈｅｇｏｎａｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ａｓｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｈｅｅｍｂｒｙｏ，ｔｈｅｍｕｃｏｓａ，ｓｕｂｍｕｃｏｓａａｎｄｓｅｒｏｓａhadbeengeneratedａｔ

4、ｔｈｅｄｕｃｔｗａｌｌ，ａｎｄｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔofＷｏｌｆｆｉａｎｄｕｃｔｓｔｏｐｐｅｄ，andｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅａｔｒｏｐｈied．Ｉｎｔｈｅ１９thｄａｙｏｆｅｍｂｒｙｏｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ａｓｍａｌｌｎｕｍｂｅｒｏｆｏｏｇｏｎｉａａｎｄｏｖａｒｉａｎｃａｖｉｔｙｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｇｏｎａｄ，ａｎｄｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔwasｃｏｍｐｌｅｔｅｄｉｎｔｈｅ２５thｄａｙａｎｄｔｈｅｏｖａｒｉａｎwasformed．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅdｔｈａｔｉｔwaｓtheｋｅｙｐｅｒｉｏｄｏｆｓｅｘｄｅｔｅｒｍｉｎａ

5、ｔｉｏｎｆｒｏｍ１９thｄayｔｏ２５thｄayａｎｄthedevelopmentofＭüｌｌｅｒｉａｎｄｕｃｔｗａｓｉｎ－ｐｈａｓｅｗｉｔｈｏｖａｒｙdifferentiation．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｍａｕｒｅｍｙｓｓｉｎｅｎｓｉｓ；ｓｅｘｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ；Ｍüｌｌｅｒｉａｎｄｕｃｔ；Ｗｏｌｆｆｉａｎｄｕｃｔ；ｏｖａｒｙ　　　　性别分化及性腺发育是发育生物学中最为活跃的研究领域之一，尤其是具有２亿年进化史的龟类性别决定更是研究的热点。胚胎性腺的生殖细胞由起源于胚盘上胚层的原始生殖细胞迁移到生殖嵴，然后移行至下胚层，进入血液随血液循环至原始生

6、殖嵴，并发生增殖和分化而来。生殖细胞随着动物性腺的发育而成为成熟的配子。性别分化过程中性腺与性原细胞相互作用的机制尚不明了，到底是性腺诱导了ＰＧＣ的迁移还是ＰＧＣ的作用诱导了性腺的发生，目前还没有足够的证据。已有的研究表明，龟类性别决定有两种类型：一种是遗传依赖型，其性别由遗传物质决定；另一种为温度依赖型，其性别由孵化期内的环境温度决定［１－３］。对于ＴＳＤ机制物种，由于缺少性染色体，其性别分化具体是先出现ＰＧＣ向精原细胞或卵原细胞分化后诱发性腺分化，还是温度作用使得性腺出现雌雄分化后诱发生殖细胞的特化，有待研究。　　关于龟鳖类性别决定研究较多的是温度与性比的

7、关系以及性别调控机制，有关性别分化起始时间及分化过程则研究较少。早期有关中华鳖［４］和乌龟［５］性腺发育的研究主要侧重于雌雄分化已完成的胚后发育。中华条颈龟，又称中华花龟，本研究在２９℃下对中华条颈龟的受精卵进行孵化，通过对性腺及生殖管道的组织形态学观察，考察了缺少性染色体的中华条颈龟的性别决定特征及方式，丰富了动物性别分化理论。　　１材料与方法　　１．１实验材料　　实验用中华条颈龟卵于２００９年３月３日购自海南文昌龟鳖养殖场，对受精卵进行测量和编号。　　１．２实验方法　　中华条颈龟受精卵２９℃时孵化期为５４ｄ，孵化率较高，２５℃时为１００ｄ，孵化率较低。本实

8、验设置孵化温度为２９℃，用透气的塑料盒