白花蛇舌草注射液诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡的机制研究.pdf

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1、临床研究白花蛇舌草注射液诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡的机制研究王红永河南省郑州市新郑市中医院451150【摘要】目的：观察白花蛇舌草注射液对非小细胞肺癌A549细胞生长的抑制，并探索其机制。方法：选择我院2013年6月至2014年7月内科所收治的患有肺癌的30位患者随机分为两组，每组l5人，作为观察的15位患者加白花蛇舌草注射液治疗．作为对照组用常规方法治疗，并观察对照其疗效，分析加用白花蛇舌草注射液后肺癌A549细胞凋亡的机制。结果：观察组肺癌A549细胞凋亡的数目远远多于对照组，凋亡的时间也比对照细要

2、短许多。结论：白花蛇舌草注射液诱导肺癌A549细胞凋亡可能与激活casgase-8、Gtspglse一9、c；tspase一3有关。【关键词】白花蛇舌草注射液；肺癌A549细胞；凋亡机制就目前医学界而言，癌症是首当其冲要攻克的一个难题，它白花蛇舌草注射液作用24h，肺癌A549细胞caspase8、是危险人类生命最大的疾病。而肺癌又是癌症当中较为常见，发caspase一3表达明显高于对照组。见表2。病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤2．3加用caspase一9抑制剂后caspase-3的

3、变化之一。因此研究肺癌细胞凋亡的机制对治疗肺癌有着重大的意义。白花蛇舌草注射液组加用caspase-9抑制剂后作用24h，1一般资料与方法caspase一3表达由(23．61±0．398)umo1．L明显下降到1．1一般资料(14．18±2．112)umol·L～，但仍高于对照组(3．69±0．486)选择我院2013年6月至2014年8月内科所收治的患有肺癌的umol·L。见表3。30位患者随机分为两组，每组15人，作为观察的l5位患者加白表1肺癌A549细胞的凋亡率花蛇舌草注射液治疗，作为对照组用常规方法

4、治疗，并观察对照其疗效，分析加用白花蛇舌草注射液后肺癌A549细胞凋亡的机制。l_2方法表2白花蛇舌草注射液对caspase一8、caspase一9、caspase一3的表达的影响流式细胞仪测定5Oumol·L白花蛇舌草注射液或空白对照培养液的肺癌A549细胞凋亡率与凋亡相关蛋白caspase9表达；比色法测定凋亡相关蛋白caspase一3，caspase一8表达；观察加表3加用caspase一9抑制剂后caspase一3表达的变化(iSmol·L，n=3)用caspase一9抑制剂后caspase一3的表达

5、。肺癌细胞株A549；ANNEXIN—v—FITC凋亡检测试剂盒和ApoAlertCaspase系列比色法试剂盒(BDBiosciencesPharmingen)；caspase一9抑制剂z3讨论VAD—FMK和caspase一9测定试剂盒(Merch公司)。当今社会因为人们生活环境的严重破坏和人类生活方式等方1．3caspase一3、caspase一8测定面的影响，人类的疾病也越来越多，越来越怪，越来越复杂。目应用A公司ApoAlertCaspase系列比色法试剂盒测定，具前癌症就是威胁人类生命健康最严重的

6、疾病，而且该疾病是世界体步骤如下：①将收集的患者肺癌A549细胞3，000r·min离上任何一个国家都无法治愈的，它是目前医学界最大的难题，也心5min去上清液；②用冷细胞裂解缓冲液50L重悬细胞，置是最难攻克的难题。冰上孵育lOmin。③4℃离心机14，O00r·min离心lOmin，沉淀根据上述证明得知百花蛇舌草注射液不仅有抑制肿瘤的作细胞碎片，将上清液转移至新的离心管，置冰上；④每份加入用，还有增强免疫力、抑制生精、抗蛇毒的作用，临床上还将它50uL2X反应缓冲液／DTT混合液；⑤每份加入5uLlmmo

7、l·L用于治疗小儿肺炎，治疗阑尾炎、输精管结扎术后副睾郁积症、的caspase一3底物或caspase一8底物，37~C水浴箱孵育lh：⑥用毒蛇咬伤、盆腔炎、附件炎、胃炎、肝炎、良性甲状腺结节、痤疮、微板读取器在405nm读取吸光值，根据标准曲线计算浓度；⑦标顽固性外阴湿疹等各方面的疾病。它还是一种民族医药：苗药、准曲线绘制：用DMS0溶解稀释pNA，分别制成0mmol·、0．5瑶药、壮药、佤药、阿昌药、傣药等。就当今世界疾病的发展来mmol·L、1．0mmol·L～、2．0mmol·L和4．0mmol·L的

8、储藏液；看癌症是卫生医疗界最难攻克的疾病。所以白花蛇舌草注射液诱各组取5uL储藏液，分别加入95uL的细胞裂解缓冲液，制成终导非小细胞凋亡的机制对医学界有重要的意义，也是一个里程碑。浓度为0umol·L、25lmol·L一、50mol·L、100umol·L、4结论200umol·L的pNA：用微板读取器在405nm读取吸光值；以pNA白花蛇舌草注射液诱导肺癌A549细胞凋亡可能与激活为横坐标、吸光