低离子聚凝胺技术.ppt

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1、低离子聚凝胺技术原理聚凝胺（Polybrene），一种高价离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。LISS(低离子强度溶液)的原理抗原非离子静电作用力抗体静电作用力离子抗原抗体当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强基本操作方法1、试管中加入待检血清或血浆1滴2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴3、摇匀，室温放置1分钟（时间长

2、，效果好）4、加Polybrene试剂1滴，混匀后3400rpm离心15秒5、轻摇观察由Polybrene引起的红细胞非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验6、加入1滴重悬液，轻摇观察结果由Polybrene引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开聚凝胺(Polybrene)配血方法患者献血者主侧次侧室温放置1分钟Polybrene上海市血液中心血主次侧均加聚凝胺聚凝胺(Polybrene)配血方法离心聚凝胺引起红细胞非特异性凝集阳性阴性重悬液上海市血液中心血主次侧均加重悬液看结果经典操作方

3、法1、试管中加2滴待检血清或血浆，加1滴试剂红细胞2、加LIM溶液0.6毫升（或12滴）混匀，室温放置1分钟3、加Polybrene试剂2滴，混匀后3400rpm离心15秒4、倒去上清液，轻摇观察由Polybrene引起的红细胞非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验4、加入1滴重悬液，轻摇观察结果由Polybrene引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开结果判定阴性结果：红细胞迅速散开，并在1分钟内完全散开阳性结果：红细胞不完全散开，弱凝集可能在30分钟内明显减弱或消失，因此，以立刻观察结果

4、为准质控试验：可以用阳性对照液代替待检血清，按同样步骤进行质控试验，结果应为“1+”的弱凝集说明及注意事项1、配置LIM红细胞悬液：取抗凝或不抗凝血样标本的压积红细胞可直接加LIM溶液配置悬液，若红细胞中含有较多血清或血浆，则需要用LIM溶液洗涤红细胞一次，红细胞悬液为2~3%，该悬液可替代盐水红细胞悬液使用2、加入血清量应严格按照操作方法，多加血清会提高离子强度，降低致敏效果。3、使用肝素抗凝的血浆配血需多加1滴Polybrene，以中和肝素