改良低离子聚凝胺法促进剂实验操作规程

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1、改良低离子聚凝胺法促进剂实验操作规程1、目的：减少交叉配血试验的假阳性。2、适用范围：交叉配血、血型鉴定、抗体筛检血型血清学试验。3、试剂来源：中山市生科试剂仪器有限公司4、采集与处理：4.1脉采血3-4ml，并观察是否溶血、乳糜血，如有此现象应再留标本并做记录。4.2检查留样试管、标签、标号、姓名、血型是否齐全，如有遗漏应拒收。4.3将血标本试管放370C水浴中10分钟，离心。1、 标准操作：1、主（次）管加入受（供）血者血清2滴，加供（受）血者4%红细胞盐水悬液1滴。2、各管加LIM0.8m

2、l，混匀，静置1分钟，各管加Promoter1滴，混匀，3000转/分离心15秒，倒出上清液（残留约0.1ml），扣摇，肉眼可见明显的凝集状（如无凝集须重做），加假凝集清除液1滴与管底，轻摇，凝集1分钟内消失呈均匀混悬液，为阴性，凝集1分钟内不能被消除，即为阳性。2、 结论：阳性表示受（供）血者血清中含供（受）者红细胞血型Ag相应的Ab（IgG、IgM），供受血者不相容，阴性表示供受血者相容。3、 注意事项：8.1操作者须严格按照操作说明进行试验，红细胞浓度、血清滴量、反应时间、离心速度等均可影

3、响试验结果。8.2若为弱凝集结果，本试剂盒按下述试验操作方法，还可进一步提高试验灵敏度。试验操作方法如下：8.2.1检测管中加试验血清2滴，4%红细胞盐水悬液1滴。8.2.2加LIM0.8ml，混匀，静置1分钟，各管加Promoter2滴混匀，3000转/分离心15秒，倒出上清液（残留约01ml），扣摇，肉眼可见明显的凝集状（如无凝集须重做），加假凝集清除液1滴于管底，轻摇，凝集1分钟内消失呈均匀混悬液，为阴性，凝集分钟内不能别消除，即为阳性。8.3检测标本应为非抗凝血，如标本中含抗凝成分的含量

4、过高明显干扰凝集反应，可适当调加Promoter的滴量，以中和抗凝成分的干扰。8.4试验温度以20-300C为宜，若为寒冷凝集，370C水浴分钟，在此温下观察，凝集消失，说明冷凝集素存在。8.5肉眼直观判断的结果应确保与显微镜下观察结果一致，直观不能明确判断的可疑结果须镜检，镜下：阴性结果应该是单个RBC均匀分布，有RBC凝集状散在的即为若阳性。8.6试验质量检验：取自身血清与自身红细胞用本试剂盒试验方法作自身阴性对照试验，取IgG抗D血清与RhD（+）RBC用本试剂盒试验方法作阳性对照实验，对

5、照实验符合，试剂有效。8.7疑难结果以抗人球蛋白实验（AGT）作终判断试验，试验操作参照经典AGT（在AGT中，加入本试剂盒中的LIM0.8ml370C孵育时间可缩短至10分钟）。8.8本试剂盒适宜大多数血型抗体的检测，但对kell血型系统抗体（主要存在白种人群）检测效果较差，由于我国黄种人群中kell血型系统抗体阳性者罕见，因此适合在国内推广。可补充抗人球蛋白试验，以提高对kell血型系统抗体的检出率。关键词：聚凝胺交叉配血1.  目的：检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型2.  原理：凝聚

6、胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥的特异性凝集。3.  适用范围：配血、免疫性抗体检查、红细胞血型鉴定、特殊的研究4.  所需材料：聚凝胺试剂、定型血清、谱细胞、洁净试管、滴管、离心机5.  操作程序：（以交叉配血为例）5.1  以生理盐水洗涤受血者和献血者红细胞1—3次，配成3-5%的悬液。5.2  交叉配血试验：主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC悬液。次侧：2滴供者血清加1

7、滴患者3-5%的RBC悬液。阳对：2滴抗-D血清加1滴RH（+）3-5%的RBC悬液。自身对照：2滴患者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。5.3  每只试管加600微升低离子液，混合放置1分。5.4  分别加2滴Polybrene应用液，混合放置15秒。5.5  离心3400转/分15秒，弃上清，控干。5.6  观察管底有无聚凝物，如果没有则需重做。5.7  每管各加2滴解聚液，轻轻混合10秒，观察结果并做记录。5.8  结果判定：10秒内若为Polybrene引起的聚合应该会散开，判为阴性。

8、若为抗原抗体引起的凝聚则不会散开，判为阳性。6.  注意事项：6.1  可以用EDTA血浆代替血清6.2  加入解聚液后应该在3分钟之内观察结果6.3  解聚液不可多加，以免降低试验灵敏度。作规程SOP----输血科-----0021.项目名称：血型鉴定试验2.测定原理：利用抗原抗体反应的原理，用已知A1、B、O红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A抗B抗体（反向定型），结合正定型结果判定病人的血型。3.标本要求：3.1抽取受血者静脉血3-4ml，于EDTA（2Na）抗凝的试管中。3.2受血者和供