杜:12基因工程的基本操作程序学案.doc

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1、专题1基因工程1.2基因工程的基本操作程序【学习目标】1、简述基因工程原理及基本操作程序。2、尝试设计某一转基因生物的研制过程。【自主学习】1、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:_________________________、_____________________、_________________________、_____________________________。2、目的基因的获取目的基因可以从____________________________,也可以用_________________。目的基因主要是指___

2、_________________,也可以是一些____________________________。获取目的基因的方法有以下几种:________________________、_______________________________、______________________________________。3、基因表达载体的构建基因工程的核心是___________________。一个基因表达载体的组成除了________外,还必须有______、______以及________等。4、将目的基因导入受体细胞转化是指__

3、_________________________________________________________。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是______________,除此之外,还有________和______________等方法。______________是转基因动物中采用最多,也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:首先用_______处理细胞,使细胞处于一种___________________________________的生理状态,这种细胞称为__________。5、

4、目的基因的检测与鉴定要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因,非常关键,检测方法是______________。以__________________________________________作为探针。要检测目的基因是否转录出了mRNA,检测方法是___________。检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是______________。除了上述分子检测外,有的还需要进行____________________的鉴定。【合作探究】探究一目的基因的获取想一想,为什么要有这一步?阅读回答:1、目的基因2、目的基因的获取方法有(1)什

5、么是基因文库?基因组文库?部分基因文库?后两者是什么关系?(2)利用PCR技术扩增目的基因。①PCR:是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。②条件:已知目的基因的序列(模板)、原料、、等。③过程:三个环节。④原理:⑤方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)⑥PCR技术与DNA复制的区别?(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。①.反转录法②.根据已知的氨基酸序列合成DNA法:探究二、基因表达载体的构建问题1:为什么要构建基因表达载体?单独的DNA片段能不能稳定遗传?问题2:基因表达载体的构成包括哪些元件?基因表达载

6、体的组成:++++问题3:什么是启动子、终止子?各有什么作用?思考:启动子、终止子、起始密码、终止密码的区别是什么问题4:基因工程的运载体是否必须要有标记基因?其作用是什么?如果标记基因是一个四环素基因,如何筛选?问题5:怎样才构建基因表达载体?(填空)用一定的_________切割质粒,使其出现一个切口,露出____________。用_____________切断目的基因,使其产生________________。将切下的目的基因片段插入质粒的______处,再加入适量___________,形成了一个重组DNA分子(重组质粒)附图探究三

7、、目的基因导入受体细胞---转化问题1:什么是转化?比较将目的基因导入受体细胞方法?问题2:哪些细胞可以作为受体细胞?)早期的基因工程为什么选择原核生物作为受体细胞?探究四步骤四:目的基因的检测与鉴定——检查是否成功问题1:受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗?问题2:(1)目的基因的检测与鉴定可以从什么水平来做?核酸杂交技术基本过程是?什么是探针?如何检测目的基因是否翻译出蛋白质?如何从个体生物学水平鉴定转基因抗虫棉?练习:下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。1)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?为

8、什么?(2)过程②必需的酶是酶,过程③必需的酶是酶。(3)与人体细胞中胰岛素基因相比,通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和。(4)若A中共有a个碱基对,其中鸟嘌

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