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时间:2018-07-18
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1、www.ks5u.com1.2基因工程的基本操作程序【自主学习】基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:__________________的获取,的构建,将目的基因________________,目的基因的一、目的基因的获取1.目的基因:主要是指_________________的基因,也可以是一些具有的因子。2.获取目的基因是实施基因工程的第一步。目的基因的获取方法主要有两种:①从自然界中已有的物种中分离出来②_______________________。3.基因文库——将含有__________________
2、_________片段,导入中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。基因文库根据其大小可分为_______________和__________________。受体细胞是指接受______________的细胞,即表达载体导入的细胞。基因工程常用的受体有_________、__________、__________________。4.PCR技术扩增目的基因原理:DNA复制做法:已知__________________→据已知序列合成__________→DNA扩增结果:扩增出__________
3、________的目的基因。5、人工合成法:如果基因比较小,又已知_____________,可借助_______________用化学方法直接人工合成。二、基因表达载体的构建基因表达载体的构建是基因工程的_____。其中心内容是_________________,形成_____________,最后通过重组运载体将目的基因导入______________。1.构建表达载体的目的:(1)使目的基因_____________________,并可_________________,(2)使目的基因能够___________
4、______________。2.基因表达载体的组成:目的基因、________________、________________、_____________________。3.启动子是一段__________________________的DNA片段,位于基因的__________,它是____________识别和结合的部位,有它才能驱动基因转录出___________,最终获得所需要的蛋白质。4、终止子位于基因的______________,也是一段具有特殊结构的DNA短片段,相当于一盏红色信号灯,使转录在__
5、__________________________5、标记基因的作用是____________________________________,从而将含有__________________的细胞筛选出来。三、将目的基因导入受体细胞1、转化——目的基因进入_________________内,并且在受体细胞内_______________和________的过程。2、将目的基因导入受体细胞的方法:①将目的基因导入植物细胞——_______________:双子植物或____________基因枪法:__________
6、_____花粉管通道法。②将目的基因导入动物细胞——________________________,常用的受体细胞:________________③将目的基因导入微生物细胞——________处理细胞法,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为)四、目的基因的检测与鉴定1检测对象:分子检测:①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了____________,可用_____________;②检测目的基因是否_______________,可用__________________________
7、;③检测目的基因是否_______________,可用;_________________________。(2)检测方法:分子检测法——①和②都是分子杂交技术,③抗原-抗体杂交法;形态检测法——可根据目标性状的有无来判断目的基因是否表达;个体生物学水平鉴定:如做抗虫或抗病接种实验。五、教材深化:人工合成目的基因的过程:①目的基因转录成的mRNA单链DNA双链DNA(目的基因)②蛋白质中氨基酸的序列mRNA中的碱基序列DNA碱基序列目的基因目的基因【课后练习】1.1993年,我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的最新转基因抗
8、虫棉,其抗虫基因来源于( )A.普通棉花的基因突变B.棉铃虫变异形成的致死基因C.在棉铃虫体内寄生的线虫基因D.苏云金芽孢杆菌体内的抗虫基因2.镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是( )A.解旋酶B.DNA连接酶C.限制性内切酶D.RNA聚合酶3.科学家已经能够
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