叶下珠提取物对肝癌细胞的抑制和对Bcl-2表达的影响-论文.pdf

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1、科技·探索·争I乌Sc科ience&技Tech视nology界Vision叶下珠提取物对肝癌细胞的抑制和对Bcl一2表达的影响洪剑锋饶力群(湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙410128)【摘要】文本主要探讨叶下珠提取物对人肝癌细胞的抑制作用及其对Bc1—2的表达的影响。在倒置显微镜下利用利用MIrr比色法观察体外培养的人肝癌细胞株(BEL-7404)在不同浓度的叶下珠提取物作用后的形态变化.通过这种方法来确定各种浓度下的叶下珠提取物对于肝癌细胞的抑制程度。同时制作爬片,利用细胞免疫化学法测定Bcl一2在细胞中的表达情况。结果显示叶下珠提取物对

2、于肝癌细胞有抑制作用.且抑制效果在实验范围内随着药物的浓度增加而增强。并且,叶下珠提取物能够减弱Bcl一2在体内的表达程度说明叶下珠提取物通过下调细胞凋亡抑制基因Bcl一2的表达.从而促进肝癌细胞的凋亡【关键词】叶下珠:提取物:BEL_74O4:Bcl一2【Abstract]ThestudymainlydiscussestheeffectsofPhyllanthusextractonhumanhepatomacelllineanditsontheexpressionofBcl一2.Underaninvertedmicroscopeobservati

3、onusingtheMTTassayculturedhumanhepatomacelllinefBEL一74041indifferentconcentrationsofPhyllanthusextractsmorphologicalchangesaftertheaction,throughthismethodtodeterminetheconcentrationsofvariousleafPhyllanthUSextractthedegreeofinhibitionofhumanhepatomacells.Whilecellsgrowoncover

4、slipsproduction.determinedusingcellimmunochemicalBcl一2expressionincells.TheresultsshowedthatPhyllanthusextractsinhibitedthehepatomaceils,andtheinhibitoryefectwithintheexperimentalrangeincreaseswiththeconcentrationofthedrugincreased.And,PhyllanthusextractscandecreaseBcl一2expres

5、sionlevelsinvivo.DescriptionPhyllanthusextractinhibitedapoptosisbydown—regulatinggeneexpressionofBcl-2,therebypromotingapoptosisofhepatomaceils.【Keywords】Phyllanthus;Extracts;BEL一7404cell:Bcl一2、据研究表明.我国原发性肝癌死亡率达到O.204%。Ⅲ.是一种极易5min,再以多聚甲醛室温下作用30min对细胞进行固定。再按免疫细转移和复发的恶性肿瘤,严重的威胁着

6、人们的身体健康许多研究发胞化学染色步骤操作,DAB显色,检测细胞着色程度。现,癌细胞的产生与正常细胞中促进和抑制细胞发生凋亡的基因之间1.3统计学处理的平衡被打破,导致细胞不能启动正常的细胞凋亡程序有关.其中采用SPSS17.0软件对实验结果进行分析.实验数据l:2x+s的形式Bcl一2基因即为一种细胞凋亡的抑制基因目.其表达产物Bcl一2蛋白能来表示,SNK—q检验进行两两组间比较。与一种细胞凋亡促进基因Bax的产物——B蛋白发生结合.从而竞争性的抑制Bax自身所形成Bax—Bax二聚体.这种二聚体被认为能够2结果促进细胞凋亡的的形成。叶下珠为大

7、戟科植物.是我国传统的中草药.2.1叶下珠提取物对肝癌细胞的抑制作用具有较好的保肝护肝作用Blumberg博士口嗵过叶下珠对土拨鼠的肝作用时间相同条件下.OD值随着叶下珠提取物浓度的增大而减癌的抑制作用实验表明其具有明显的抗肝癌作用本实验通过叶下珠小;作用药物浓度相同条件下,OD值随着作用时间的延长而减小。说提取物对BEL一7404肝癌细胞的体外实验.观察其对肿瘤细胞的抑制明叶下珠提取物对BEL一7404肝癌细胞的抑制作用呈时间剂量依赖作用及对肿瘤细胞内Bcl一2表达的影响关系。具体数据见表1:1材料与方法表1细胞凋亡的M1_r检测、\作用时间1.

8、1材料药物浓茇\24h48h72h细胞株:人肝癌细胞株BEL一7404购自上海南方基因公司主要试剂:抗体bcl一2购自上海

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