大鼠失血性休克早期肠肝组织TNF-α tmRNA的动态变化及腹腔复苏的干预影响-论文.pdf

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1、·14·曼!里IntegratedTraditionalChineseandWesternMedicineFebruary2014Vo1．24．No．1[文章编号]1007—0893(2014)01—0014—03大鼠失血动性态休变克化早及期腹肠腔肝复组苏织的T干N预F—影o【mRNA的响邓哲方道奎王卫东赵中江冯永文刘德红王雪梅孙冀武(1．深圳市第二人民医院急诊科，广东深圳518035；2．深圳市疾病控制中心，广东深圳518055；3．深圳市急救中心，广东深圳518035)[摘要]目的：观察失血性休克后肠和肝组织内TNF—mRN

2、A表达、肠和肝病理损伤的动态变化，以及分别用复方氯化钠和临床腹膜透析液腹腔复苏后的干预影响，探讨腹腔复苏对失血性休克继发肠和肝损伤的保护作用及机制。方法：RT—PCR法检测对照组、休克组、IR1组(腹腔注射复方氯化钠)和IR2组(腹腔注射2．5％葡萄糖腹透液)肝组织TNF一mRNA表达；观察肠和肝组织病理改变及各组死亡率。结果：休克组肝组织TNF—mRNA表达在复苏后6h内随时间延长而增加；但其肠组织TNF一mRNA表达高峰出现于复苏后2h。休克组肠和肝组织各时点TNF—dmRNA表达均高于对照组(P均<0．05)。IR2组肠和

3、肝TNF一仅mRNA表达均比休克组降低，其发生轻度以上病理损伤的大鼠比例要小于休克组及IRl组(P均

4、压为396mOsm／L：环血管呈持续进行性收缩及低灌注状态，因而常因终末器RT—PCR试剂盒(日本TaKaRa公司)；官损伤而导致多器官系统功能衰竭甚至死亡。GelDoc2000型凝胶电泳成像分析系统(美国Bio—腹腔复苏(intraperitonealresuscitation，IR)是近年提RAD)。出的休克复苏新方法，可防止器官衰竭发生并降低死亡1．2实验动物模型制作、分组与处理率，被认为是“数十年来可望改善休克复苏效果的重大突1．2．1实验动物及分组健康雄性成年SPF级Wistar破”⋯，但其机理尚未完全明确。本实验拟复

5、制失血休克大大鼠96只，体重200—220g，随机分为4组：假手术组鼠模型，观察失血性休克后早期不同时点大鼠死亡率、肠(对照组)、失血性休克常规复苏组(休克组)、失血性和肝组织内TNF一0【mRNA表达、肠和肝病理损伤的动态休克腹腔复苏复方氯化钠液组(IR1组)、失血性休克腹腔变化，以及分别用复方氯化钠和临床腹膜透析液腹腔复苏复苏腹膜透析液组(IR2组)。每组各24只；各组动物又后的干预影响，从而探讨腹腔复苏对失血性休克后早期肠、肝损伤的保护作用及可能机理。分失血性休克复苏后1h、2h和6h共3个时点，每组每个1材料与方法时点各

6、8只大鼠。1．1实验材料1．2．2创伤性休克动物模型制作采用Wiggers改良法TNF—Ot弓I物：5’一CACGCTCTTCTGTCTACTGA-3’制备失血性休克大鼠，模型动物称重后，以质量分数为10(上游)，5'-TGAATCTGTAGTGCCTCAGG一3’(下游)；g／L的戊巴比妥钠(40mg／kg)腹腔注射麻醉，将动物固B—acfin弓I物：5’一AACCGTGAAAAGATGACCCAGAT-3’定。肛温维持在(37．0±O．5)℃。眨眼反射及疼痛回缩反(上游)；5I_GTGGACAGTGAGGCCAGGAT-3’

7、(下射消失后，行单侧颈动脉及右股动脉、静脉插管(置管前行肝素化)。股动脉插管以备放血或采血检查各项指标，游)。股静脉插管以备液体复苏输液用。颈动脉插管后连接到上述引物均由上海生工生物工程公司合成。LMS一2B型二道生理记录仪监测血压，稳定10min。以12．5％葡萄糖腹膜透析液(广州百特医疗用品有限公mL／min的速度从股动脉放血到含肝素的注射器内，直到血司)组成：每100mL中含：葡萄糖2．5g，氯化钠538[收稿日期]2012—10—03[基金项目]深圳市科技计划资助项目(201002033)深圳中西医结合杂志2014年2月

8、第24卷第1期·l5·压为平均动脉压(meana~erialpressure，MAP)的40％并细胞浸润，血管扩张不明显；复苏后6h可见大量绒毛脱维持60min。当血压低于40％MAP时，通过股静脉持续少落，残存绒毛明显水肿、稀疏、长短不一，固有层大量中量泵入生