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时间:2020-05-04
《Na2SO4双水相萃取木瓜蛋白酶的研究-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、食品-II斜妓讲究与摆讨S咒andTechnologyofFoodIndustryPEG/Na2so4~]t水相萃取木瓜蛋白酶的研究王伟涛,张海德,蒋志国,董安华,许英豪,彭健,王斐(海南大学食品学院,海南海口570228)摘要:采用聚乙二醇(PEG),硫酸钠(Na2SO)双水相体系对木瓜蛋白酶进行分离提取。考察各成相试剂及pH对木瓜蛋白酶活性的影响,研究体系中不同相对分子量PEG、硫酸钠和PEG的质量分数、pH、酶添加量等因素对木瓜蛋白酶在两相体系中分配行为的影响,采用响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的最佳分离条件,并进行了实验室规
2、模的放大。结果表明:NazSO的质量分数对分配行为的影响极显著,其次是PEG的质量分数,pN对分配行为的影响不显著。当两相体系中PEG的相对分子量为6000,质量分数为16.0%、Na2SO质量分数为18.O%、pH7.0、酶添加量为1.0mg/g时,木瓜蛋白酶在两相体系中的分配系数最高可达3.1,可获得木瓜蛋白酶活性回收率82.6%。实验证明:响应面法优化双水相萃取木瓜蛋白酶的条件是可行的,可用于实际预测。关键词:木瓜蛋白酶,双水相,分配系数,酶活性回收率Extractionofpapaininaqueoustwo-phasepol
3、yethyleneglycol/sodiumsulfatesystemsWANGWei-tao,ZHANGHai-de,JIANGZhi-guo,DONGAn-hua,XUYing-hao,PENGJian,WANGFei(CollegeofFoodScienceandTechnology,Haikou570228,China)Abstract:ThepapainwasseparatedandextractedbyPEG/Na2s04aqueoustwo-phasesysteminthisstudy.Theinfluence0frea
4、gentandpHvalueonactivity0fpapainwereinvestigated,inthemeantime。theinfluenceofPEGwithdifferentmolecularweights,themassfractionofNa2SO4andPEG,pHandenzymeaddedondistributionbehaviorinaqueoustwo—phasesystemwasdiscussed.Theseparationconditionofpapainjnaqueoustwo—phasesystemw
5、asoptimizatedbyresponsesurfacemethod,andamplifiedinlaboratoryscale.Thestudyshowedthat:theeffect0fNaSO4massfractiononthedistributionbehaviorwassignificant,followedbvPEGmassfraction.theeffectofpHonthedistributionbehaviorwasnotsignificantThepartitioncoefficientandrecoveryr
6、ateofpapaininaqueoustwo—phasesystemachieved3.1and82.6%undertheconditionOfmolecularweightsofPEG6000,massfractionofPEG16.0%,massfractionofNa2SO418.O%,pH7.0,enzymeadded1.Omg/g.Theresultsshowedthat:theoptimizationonextractionofpapainbyaqueoustwo—phasesystemwasfeasibleandcou
7、ldbeusedtopredicttheactua1.Keywords:papain;aqueoustwo—phasesystem;partitionCOefficient;recoveryofproteaseactivity中图分类号:TS255.1文献标识码:A文章编号:1002—0306(2014)18一ol18—06doi:10.13386/j.issnl002—0306.2014.18.016木瓜蛋白酶(EC3.4.22.2)具有耐高温、稳定性好、简单、易于工程放大和连续操作等优点,非常适合大蛋白质水解能力强等特征,在食品、
8、医药等领域有广规模应用嘲。而对木瓜蛋白酶双水相萃取的研究主要泛的应用。目前木瓜蛋白酶的分离纯化方法主要有:集中PEG/(NH4)2SO和PEG/~酸盐双水相系统⋯,超滤法、盐析法、有机溶剂法、亲和层析法等。但这些PEG/
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