三氧化二砷对肝癌细胞系SMMC-7721凋亡及 Smac caspase-9、caspase-3 蛋白表达的影响-论文.pdf

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1、·6440·现代生物医学进展www~shengwuyixue.eomProgressinModernBiomedicineVoLI3NO.33NOV2013三氧化二砷对肝癌细胞系SMMC一7721凋亡及Smaccaspase-9、caspase一3蛋白表达的影响王乐陈磊李雪芬s何虹王松海。史恒军L△陈建宗△(1第四军医大学唐都NINON科陕西西安710038;2兰州大学第一附属医院普通外科甘肃兰州730000;3第四军医大学西京医院中医药研究中心陕西西安710032)摘要目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞SMMC一7721的促凋亡作用及对Smac、caspase一9、ca

2、spase一3表达的影响。方法:人肝癌细胞SMMC7721经As20处理,共分为四组,分别为空白对照组、低剂量组、中等剂量组、高剂量组。分别采用MTT、Hoechst33258染色法、AnnexinV.FITC/PI双染法观察其对SMMC-7721细胞增殖的抑制,凋亡细胞核的形态学变化,以及诱导凋亡作用:采用Westemblot法检测凋亡相关蛋白Smac、caspase.9、caspase.3表达的变化。结果:MTT显示:As203在体外能明显抑制SMMC.7721的生长,具有时间剂量依赖关系,与空白对照组相比,其余三组细胞生存率明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05):Hoec

3、hst33258显示细胞呈明显的凋亡细胞形态学特征,具有剂量依赖性;AnnexinV—FITC/PI双染法显示:As203作用24小时可诱导SMMC一7721细胞凋亡,且呈剂量依赖性,与空白对照组相比(2.69+0.58),其余三组(4.01~0.58)、(5.99+1.69)、(9.26+-2.34)差异均有统计学意义(P<0.05);Westernblot显示:As203作用SMMC一7721细胞24小时,Smac、caspase·9、caspase一3表达上升,呈剂量依赖性,与空白对照组相比,其余三组蛋白表达量明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05o结论:一定量的As2()

4、3能抑制SMMC一7721细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与调控Smac、caspase一9、caspase一3表达有关。关键词:三氧化二砷;SMMC一7721细胞;Smac;caspase一9;caspase一3中图分类号:R735.7文献标识码:A文章编号:1673—6273(2013)33—6440—05EffectofArsenicTrioxideOnApoptosisandExpressionOfSmac,Caspase-9,Caspase..3inHumanHepatocellularCarcinomaSMMC..7721CellsWANGLd~,CHENLe~,LIXu

5、e-fen3,HEHong~,WANGSong-ha~SHIHeng-junlCHENJian—zon季flDepartmentofTraditionalChineseMedicine,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi'an,Shaanxi,710038,China;2ThedepartmentofGenemlSurgery,theFirstAffiliatedHospitalofLanzhouUniversity,Lanzhou,Gansu,73000~China;3ResearchCenterofTradifona

6、lChineseMedicine,XijingHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi'an,Shaanxi,710032,China)ABSTRACTObjective:ToinvestigatetheefectofAs2O3onapoptosisandsuppresstheproliferationofthehepatocellularcarcinomacellsandtheefectontheexpressionofSmac,caspase一9,caspase一3inhepatocellularcarcinomacells.Meth

7、ods:SMMC一7721cellsweretreatedwithAs2O3,whichweredividedintofourgroups,includingblankcontrolgroup,lowdosegroup,mediumdosegroupandhighd—osegroup.CellgrowthinhibitoryratewasdetectedbyMTTcolorimetricassayevery24hours.Thenuclearmorphol

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