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《MCP-1和MIP-2在新生鼠胆道闭锁肝内胆管损伤及肝纤维化中的作用-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、284中华小儿外科杂志2014年4月第35卷第4期ChinJPediatrSurg,April2014,Vo1.35,No.4·实验研究·MCP一1和MIP一2在新生鼠胆道闭锁肝内胆管损伤及肝纤维化中的作用吴四海黄磊楼跃陆巍峰王新法鞠黎【摘要】目的建立轮状病毒(RRV)感染Balb/c新生鼠致胆道闭锁(biliaryatresia,BA)动物模型,并探讨单核细胞趋化蛋白一1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白一2(MIP_2)在BA新生鼠肝内胆管损伤及肝纤维化过程中的作用机制。方法采用腹腔注射猴MMU18006轮
2、状病毒毒株,诱导Balb/c新生鼠产生胆道闭锁作为实验组,腹腔注射相同剂量的病毒培养液(10FBS-DMEM,10胎牛血清达尔伯克改良伊格尔培养基)为对照组。在注射后4、7、14及21d各处死一批小鼠,取得胆管及肝组织,通过苏木精一伊红(HE)染色分析其肝外胆管及肝脏组织学改变,免疫组化法检测MCP-1和MIP-2在肝组织中的表达,Masson染色观察肝内纤维化程度。应用Image-ProPlus图像分析软件对MCP-1和MIP-2及肝纤维化程度进行半定量分析。结果实验组小鼠体重增长明显慢于对照组,且出现皮肤
3、黄染等胆道梗阻症状;实验组小鼠肝胆系统出现急慢性炎症反应,且可见肝外胆管狭窄(7d)及闭锁(14d);实验组小鼠肝内MCP-1和MIP-2的表达量在各时期内均明显高于对照组(21d时,实验组小鼠肝内MCP-1和MIP-2的阳性指数分别为24902.85±2420.38、6215.47±469.83,而对照组分别为5168.16±627.30、783.38±46.19,Pd0.001),并且两者成正相关(r=0.918,P<0.001);实验组小鼠肝实质内可见大量胶原蛋白沉积E21d时,实验组小鼠肝内胶原蛋白所
4、占面积为(35.30±5.45),而对照组为(6.71±0.83),P%0.001],甚至纤维化,并且胶原蛋白沉积面积与MCP-1表达量成正相关(r=0.529,P=0.005),而对照组未见明显胶原蛋白沉积。结论BA是一种由病毒感染诱发、多种炎症因子介导的免疫炎性疾病,MCP-1以及MIP-2的高表达可能在诱导BA新生鼠胆管损伤及肝纤维化方面起重要作用。【关键词】胆道闭锁;单核细胞趋化蛋白;巨噬细胞炎性蛋白Mechanismsofbileductinjuryandliverfibrosisinducedby
5、MCp-1andMII._2inlivertissuesofbiliaryatresiamiceWuSihai,HuangLei,LouYue,L“Wfeng,WangXinfa,JuLi.DepartmentofPediatricSurgery,AffiliatedNanjingChildrensHospital,NanjingMedicalUniversity,Nanjink210008,ChinaCorrespondingauthor:HuangLei,Email:surgeonhuang@126.co
6、m[Abstract]ObjectiveToestablishamodelofbiliaryatresia(BA)byinfectingneonatalmicewithrotavirus(RRV)andexplorethemechanismsofintra-hepaticbileductinjuryandliverfibrosisunderahighexpressionofMCp-1andMIP-2inBAmurineliver.MethodsRRVwasinjectedintraperitoneallyto
7、induceBAofneonatalmiceasexperimenta1groupwhile10fetalbovineserum-Dulbecco'smodificationofEaglesmedium(FBSIDMEM)wasinjectedascontro1group.Theneonata1miceweresacrificedatDays4,7,14and21andtheirextra-hepaticbileductsand1ivertissueswereharvested.Thehistologica1
8、changesofextra-hepaticbileductsandlivertissueswereanalyzedbyhematoxylin-eosinstaining.TheexpressionsofM
9、CP一1andMIP一2inBAmiceliversweredetectedbyimmunohistochemistryandfibrosisbyMassonstaining.AndImage-
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