体内外高脂对肝脏NLRP3炎性小体相关基因表达的影响-论文.pdf

《体内外高脂对肝脏NLRP3炎性小体相关基因表达的影响-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、ChinJGastroenterol，2014，Vo1．19，No．1·论著·体内外高脂对肝脏NLRP3炎性小体相关基因表达的影响术隋永恒连敏华静上海交通大学医学院附属仁济医院消化内科上海市消化疾病研究所(200001)背景：炎症一免疫系统活化是非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生、发展的重要机制。炎性小体介导的促炎细胞因子活化在NAFLD中的作用日益受到重视。目的：探讨体内外高脂处理对肝脏NLRP3炎性小体相关基因表达的影响。方法：30只C57BL／6J小鼠随机分为高脂饮食组和正常饮食组(对照组)，喂饲16周后处死小鼠，光学

2、显微镜下观察肝组织病理学表现。以胶原酶原位灌注法分离正常饮食组小鼠肝细胞，分别以含饱和脂肪酸[棕榈酸(PA)]、单不饱和脂肪酸[油酸(OA)]、多不饱和脂肪酸[二十二碳六烯酸(DHA)]的培养液培养，以油红0染色检测肝细胞内脂质沉积。以real—timePCR法和蛋白质印迹法检测肝组织和肝细胞中的NLRP3、caspase一1、白细胞介素(IL)一1BmRNA和NLRP3蛋白表达。结果：高脂饮食组小鼠肝组织内可见空泡样脂肪变性。PA、OA和DHA组肝细胞内可见中一大量脂质沉积。与对照组相比，高脂饮食组小鼠肝组织内NLRP3、c

3、aspase．1、IL一1BmRNA表达显著升高(P<0．05)。PA组肝细胞NLRP3和IL一1pmRNA表达显著高于对照组(P<0．05)，DHA组NLRP3和IL一1pmRNA表达显著低于对照组(P<0．05)，PA、OA、DHA组caspase一1mRNA表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0．05)。PA、OA组NLRP3蛋白表达较脂多糖(LPS)组升高，DHA组NLRP3蛋白表达较LPS组降低。结论：肝内脂质尤其是饱和脂肪酸沉积可引起NLRP3炎性小体相关基因表达升高，促进肝脏局部炎症反应和NAFLD进展，而多不

4、饱和脂肪酸可降低NLRP3炎性小体相关基因表达，可能具有抗炎、保护肝细胞的作用。关键词非酒精性脂肪性肝病；脂肪酸类；NLRP3炎性小体；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶；白细胞介素1BEffectofHighFatonExpressionsofHepaticNLRF3Inflammasome-relatedGenesinvivoandinvitroSUIYongheng，LIANMin，日Jing．DivisionofGastroenterologyandHepatology，ReHospital，ShanghaiJiaotongUni

5、versitySchoolofMedicine；ShanghaiInstituteofDigestiveDisease，Shanghai(200001)Correspondenceto：HUAJing，Email：hua-jing88@hotmail．comBackground：Activationofinflammatory—immunesystemisanimportantmechanisminthedevelopmentofnon—alcoholicfattyliverdisease(NAFLD)．Inflammasom

6、e—mediatedactivationofproinflammatorycytokinesplaysakeyroleinNAFLD．Aims：ToinvestigatetheeffectofhighfatonexpressionsofhepaticNLRP3inflammasome-relatedgenesinvivoandinvitro．Methods：ThirtyC57BL／6Jmicewererandomlyassignedintohighfatdietgroupandnormaldietgroup(controlgr

7、oup)．Animalsweresacrificed16weekslater，thehistopathologyoflivertissuewasexaminedunderlightmicroscope．Hepatocyteswereisolatedfromnormaldietmicebyinsituperfusionofcollagenaseandthenwereincubatedinmediumcontainingsaturatedfattyacid[palmiticacid(PA)]，monounsaturatedfatt

8、yacid[oleicacid(OA)]andpolyunsaturatedfattyacid[docosahexaenoicacid(DHA)]，respectively．AccumulationoffatinhepatocyteswasassayedbyoilredOst