RN181过表达影响SMMC7721肝癌细胞凋亡的初步研究-论文.pdf

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1、垫堂学杂志2014年4月第14卷第4期JTr0pMed.A2014.V01.14.No.4·419··硕博专栏论著·RN181过表达影响SMMC7721肝癌细胞凋亡的初步研究彭迎霞,张贤,张雪峰,高彦君,王穗海,李纪良(南方医科大学生物技术学院,广东广州510515)摘要:目的构建过表达RN181基因的SMMC7721重组细胞株,研究RNI81对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响.并初步探讨其凋亡机制。方法构建高表达RN181逆转录病毒感染SMMC7721细胞,显微镜观察其细胞株荧光强弱,Westernblot鉴定RN

2、181蛋白表达水平;采用DAPI染色法、Westernblot检测RN181对顺铂诱导SMMC7721细胞株凋亡的变化情况。结果重组细胞株荧光表达良好,7721RN181细胞中RN181蛋白表达量高于其对照。差异有统计学意义(P<0.05)。DAPI染色法观察到在顺铂作用下,7721RN181的细胞凋亡阳性率高于其对照,差异有统计学意义(P<0.05);Westernblot检测到7721RN181的activatedcaspase一3、cleavedPARP的表达量高于对照组,pm—caspase一6,pro

3、—caspase一8的表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论RN181表达能促进肝癌细胞的凋亡,其可能通过参与死亡受体凋亡途径来促进肝癌细胞凋亡。进而推测RN181基因可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点。关键词:RN181;SMMC7721细胞株;稳定表达;顺铂;细胞凋亡中图分类号:R735.7文献标识码:A文章编号:1672.3619(2014)04.0419.03oVerexpressi0n0fI181acceleratecisplatin-inducedapoptosisOfhepat0

4、cellularcarcinomaSMMC7721cellsPENGYing—xia,ZHANGXian,ZHANGXue—feng,GAOYan·jun,WANGSui—hai,LIJi—liang(SchoolofBiotechnology,SouthernMedicalUniversity,Guangdong,Guangzhou510515,China)Abstract:ObjectiveToestablishrecombinantcelllinewithoverexpressionofRN181andi

5、nvestigatetheefectofRN181oncisplatin—inducedapoptosisofSMMC7721cells.MethodsTheSMMC7721cells,transfectedwithRN181over-expressingretrovirus,wereidentifiedthroughtheirfluorescenceandproteinlevelsofRN181.TheefectsofRN181Oilcisplatin—inducedapoptosiswereevaluate

6、dbyDAPIstainingandWesternblot.ResultsWeverifiedproteinexpressionofRN181intherecombinantcelllinesbymicroscopeandWesternblot(P

7、se-3,cleavedPARPwerehigher,pro—caspase·6andpro—caspase一8werelowerin7721RN181,comparedwithcontrol(P

8、iagnosisandgenetherapyforHCC.Keywords:RN181;SMMC7721cellline;stableexpression;cisplatin;apoptosis原发性肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是RN181(ringfingerprotein181)是由人类基因临床上常见的恶性肿瘤,其死亡率位居世界恶性肿LOC5125

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