参七内金散对四氯化碳肝纤维化模型大鼠肝星状细胞活化与凋亡的影响-论文.pdf

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1、第32卷第8期中华中医药学刊V01.32No.82014年8月CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEAug.2014DOI:10.13193/j.issn.1673-7717.2014.08.036参七内金散对四氯化碳肝纤维化模型大鼠肝星状细胞活化与凋亡的影响谢红东,侯伟,杨亦德,于盈,王凤玲,毛娟娟(台州市立医院感染科,浙江台州318000)摘要:目的:观察参七内金散抗大鼠肝纤维化的作用机制。方法:雄性SD大鼠30只随机分为3组:正常组、模型对照组、参七内金散组。以CC14皮下注射造模,首次注射

2、100%CC145mL/kg体重,之后40%CC1一橄榄油溶液3mL/kg皮下注射,2次/周,连续注射6周。造模成功后以O.8的参七内金散灌胃模型大鼠共2周,正常组与模型对照组则予以等量生理盐水灌胃,共2周。以盐酸水解法测定肝组织羟脯氨酸含量,分别以HE、天狼猩红染色观察肝组织的炎症与纤维化病理。免疫印迹及免疫组化检测0【一SMA的表达,观察肝星状细胞活化;连续切片,依次TUNEL染色与o/.一SMA免疫组化双染色,观察肝星状细胞凋亡。结果:与正常大鼠比较,模型大鼠肝组织可见大量肝组织脂肪变性及胶原病理沉积,并可见纤维间隔形成;参七内金散显著能

3、改善模型大鼠肝组织脂肪变性与胶原病理沉积,降低肝组织Hyp含量。正常大鼠仅表达少量0【一SMA,主要分布于血管壁,未见凋亡星状细胞;模型组大鼠可见大量0【一SMA表达,可见少量凋亡星状细胞;与模型组比较参七内金散组肝组织ot—SMA表达显著减少(PG0.01),但凋亡肝星状细胞显著增多。结论:参七内金散具有抗肝纤维化作用;抑制肝星状细胞活化、促进活化的肝星状细胞凋亡是参七内金散抗肝纤维化的机理之一。关键词:参七内金散;肝纤维化;肝星状细胞;细胞凋亡中图分类号:R285.5文献标志码:A文章编号:1673-7717(2014)08—1913-03

4、EfectsofShenqiNeijinDecoctiononHSCActivationandApoptosisinRatswithCCI4一inducedLiverFibrosisXIEHongdong,HOUWei,YANGYide,YUYing,WANGFengling,MAOJua~uan(DepartmentofInfectionDiseaseofTaizhouMunicipalHospital,Taizhou318000,Zh~iang,China)Abstract:0ctive:Toinvestigateanti—fibrotic

5、pharmacologicalactionsoftheShenqiNeijinDecoction(SQNJ)inrats.Methods:Theliverfibrosismodelswereinducedbyinjectionofcarb0ntetrachloride(CC14)subcutaneouslyfor4weeksinratsandthenweredividedintomodelcontrolandtreatedgroupswhilenormalratswereusedasnormalcontro1.Aftermodelestabli

6、shment,theratsoftreatedgroupswereadministeredwithSQNJwithadosageof0.8g/(kgd)bodyweightbygavagefortwoweeks.Thenormalandmodelgroupstookthesamevolumeofsaline.Theratlivertissueswereexamined.HepaticinflammationwasstainedwithHEandcollagendepositionwithSiriusred.Hydroxyproline(Hyp)

7、con—tentofliverwasassayedwithhydrochloricacidhydrolysis.Theliverproteinexpressionsofo/一.SMAweredeterminedbyimmunohistochemistrystainingandWesternblottingrespectively.ApoptoticoftheHSCinratlivertissuesweredeterminedbydualstainingbothoftheterminaldeoxynucleotidytransferraseUTP

8、—nickendlabeling(TUNEL)andofd—SMAim.munohistochemistry.Results:Modelratshad

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