不同铁负载水平影响肝星状细胞活化和凋亡的抗肝纤维化机制研究-论文.pdf

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1、中国中西医结合急救杂志2013年I1月第2O卷第6期ChinJTCMWMCritCare，November2013，Vo1．20，No．6·369··论著·不同铁负载水平影响肝星状细胞活化和凋亡的抗肝纤维化机制研究江远，张玲，邓远绮，何金洋(1．广州医学院附属深圳沙井医院中医肝病科，广东深圳518104；2．广州中医药大学热带医学研究所，广东广州510405)【摘要】目的探讨不同铁负载水平影响肝星状细胞(HSC)活化和凋亡的抗肝纤维化机制。方法根据细胞内不同铁负载水平将肝星状细胞株(HSC—T6细胞)分为空白对照组、铁沉积

2、模型组、50grnol／L去铁铵组和25pmol／L去铁铵组共4组。用定量聚合酶链反应(PCR)检测HSC—T6细胞I型胶原和转化生长因子一B(TGF—B。)的mRNA表达；免疫组化法检测HSC—T6细胞d一平滑肌肌动蛋白(—SMA)的表达；原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测HSC-T6细胞的凋亡；电镜下观察HSC-T6细胞超微结构。结果与空白对照组比较，铁沉积模型组TGFB。mRNA表达虽有所增强，但差异无统计学意义(1．594±0．168比1．477±0．126，P>0．05)，I型胶原mRNA表达则显著增强(1．3

3、54±0．076比1．197±0．104，P<0．01)。50~anol／L和25~anol／L去铁铵均能下调I型胶原和TGF—B1的mRNA表达，且50~moYL去铁铵组优于25mol，L去铁铵组(I型胶原mRNA：0．391±0．076比0．688±0．060，TGF—p1mRNA：0．421±0．068比0．714±0．090，均P

4、凋亡，表明铁在调节HSC活化和凋亡过程中发挥重要作用，而且也揭示了铁螯合剂治疗肝纤维化的潜在作用。【关键词】肝星状细胞；肝纤维化；铁；去铁铵；活化；凋亡Ananti-fibrosismechanismstudyonefec~ofdiferenceinironloadlevelsonaetivationandapoptosisofhepaticstellatecellsJIANGYuan，ZHANGLing，DENGYuan-qi，HEJin-yang．HepatologyDepartmentofChineseMedicin

5、e，AfiliatedShenzhenHospitalofGuangzhouMedicalCollege，Shenzhen518104，Guangdong，ChinaCorrespondingauthor：JlANGYuan。EmailJY76o5n@163．corn【Abstract]0bjectiveToinvestigatetheanti—fibrosismechanismfromeffectsofdifferenceinironloadlevelsonactivationandapoptosisofhepatics

6、tellatecells(HSCs)．MethodsAccordingtothedifferenceinironloadlevelsinHSCs．HSC-T6cellsweredividedintofourgroups：blankcontrol，irolldepositionmodel，5O~mol／Ldesferrioxamineand25~moYLdesferrioxaminegroups．Quantitativepolymerasechainreaction(PCR)wasappliedf0rthedetection

7、ofcollagentypeIandtransforminggro~hfactor-pl(TGF-p1)mRNAexpressionsofHSC-T6cells．Immunohistochemicalassaywasusedforthedetectionofo／．一smoothmuscleactin(ot—SMA)expression．Themethodofterminaldeoxynucleotidyltransferase(TdT)一mediateddUTPnickendlabeling(TUNEL)wasusedfo

8、rtheexaminationofapoptosisofHSC—T6cells．Underelectronmicroscope．theuhrastructuresofHSC—T6cellswereobserved．ResultsComparedwiththeblankcontrolgroup，despi