抗Eppin抗体抑制人精子活性运动及相关机制-论文.pdf

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1、东南大学学·686·SouthJSoutheastUniv嚣Med医Sc学iE版di；)2⋯。13，。⋯ec；’32(6)：‘68。6。—691抗Eppin抗体抑制人精子活性运动及相关机制龙燕，李庆，顾爱华(1．中国药科大学药学院药理教研室，江苏南京210009；2．南京医科大学生殖医学重点实验室，公共卫生学院毒理系，江苏南京210029)[摘要]目的：阐明抗附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)抗体抑制人精子动力及分析相关机制。方法：将正常男性精子经过percol1分选后分为7组：空白对照组，抗体对照

2、组与40g·ml抗兔多克隆抗体孵育，其余5组分别与不同浓度抗Eppin抗体(浓度分别为2．5、5、1O、20和40g·ml)共同孵育4h后进行精子动力测定，线粒体膜电位(△)、ATP浓度及电镜镜检检测。结果：随着抗Eppin抗体浓度的增加，精子活力下降并．呈浓度依赖趋势；当抗Eppin抗体浓度超过5g·ml～，精子△及产生ATP浓度显著下降(P<0．05)；部分精子线粒体正常环形结构发生异常改变，亚线粒体膜变薄甚至消失。结论：抗Eppin抗体与人精子共孵育后精子线粒体功能及超微结构异常，导致精子

3、活性运动显著下降。[关键词]附睾蛋白酶抑制剂；精子活性运动；线粒体超微结构；线粒体膜电位；三磷酸腺苷[中图分类号]R-33[文献标识码]A[文章编号]1671。6264(2013)06。0686。06doi：10．3969／j．issn．167卜6264．2013．06．006Inhibitionofspermactivatedmotilitybytheanti-EppinantibodyandthepotentialmechanismsLONGYan，LIQing，GUAi’hua(1．Dep

4、artmentofPharmacology，ChinaPharmaceuticalUniversity，Nanjing210009，China；2．StateKeyLaboratoryofReproductiveMedicine，InstituteofToxicology，NanjingMedicalUniversity，Nanjing210029，China)[Abstract]Objective：Toclarifytheinhibitionofspermactivatedmotilityby

5、theanti。Eppinantibodyandthepotentialmechanisms．Methods：Semensampleswereobtainedbymasturbationfromnormaldono~．Themotilespermwerecollectedthroughdiscontinuouspercollgradientcentrifugationanddividedinto7groups．Thesperminonegroupwereincubatedwiththe40g·m

6、l～anti—rabbitantibodyandotherfivegroupswereincubatedwiththe2．5，5，10，20or40g·ml～anti。Eppinantibody．Results：Afterthespermtreatedwiththeanti‘Eppinantibody，theresultsofcomputer。assistedsemenanalysis，mitochondrialmembranepotential(△)togetherwithATPproduct

7、ionassaysmeasurementandtheimagesofelectronmicroscopyshowthereductionoftheactivatedmotility，△andATPproduction，andtheaberrationsofthehelicalpatternofmitochondriawiththepartiallossofsub—mitochondrialreticulum．Conclusion：Afterthehumanspermincubatedwithth

8、eanti。Eppinantibody，theaberrationsinultrastructureandthefunctionsofthemitochondriaofthespermresultinthereductionofthespermactivatedmotility．[收稿日期]2013‘05-08[修回日期]2013—05—26[基金项目]国家自然科学基金资助项目(81102494，81172694)[作者简介]龙燕(1978一)，女，江苏南京人，讲师，理学博士。E—mail：vi