利用卡那霉素“浸种法”准确筛选转基因小麦种子的方法研究.pdf

《利用卡那霉素“浸种法”准确筛选转基因小麦种子的方法研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、麦类作物学报2013，33(6)：1105一l110JournalofTriticeaeCropsdoi：10．7606／j．issn．1009—1041．2013．06．007网络出版时间：201311—05网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／61．1359．S．20131105．1656．038．html利用卡那霉素“浸种法"准确筛选转基因小麦种子的方法研究董福双，高义平，吕孟雨，柴建芳，王海波(1．河北省农林科学院遗传生理研究所／河北省植物转基因中心，河北石家庄0500512．保定市农

2、业科学研究所，河北保定071000)摘要：为了确定利用卡那霉素“浸种法”筛选转基因小麦后代种子的准确方法，以冬小麦种子为试材，探讨了卡那霉素溶液体积、浓度及种子粒数对筛选结果的影响。结果表明，卡那霉素溶液体积、小麦种子的粒数对筛选结果的影响与卡那霉素浓度同等重要。在卡那霉素浓度为6O～180mg·L的范围内，以“单粒分享量”(单粒分享量=卡那霉素浓度×溶液体积／种子粒数)为筛选标准，能有效地对小麦种子进行筛选。利用此方法，我们对小麦金禾9123转基因后代7个株系的412个籽粒进行卡那霉素溶液筛选，获得84株抗性苗，经PCR检测，76

3、株为阳性，卡那霉素筛选正确率达90．5；同时以7个不同遗传背景的普通小麦品种也验证了此选择方法的可靠性。关键词：卡那霉素；小麦；转基因；抗性筛选；单粒分享量中图分类号：$512．1；$332．9文献标识码：A文章编号：10091041(2013)06—1105—06StudyonAccuratelyKanamycinScreeningMethodofTransgenicWheatSeedbySeed—immersionDoNGFu—shuang，GAOYi—ping，LVMeng—yu，CHAIJian—fang，WANGHai_b

4、0(1．InstitueofGeneticandPhysiology，HebeiAcademyofAgriculturalandForestrySciences，PlantGeneticTransformationCenterofHebeiProvince，Shijiazhuang，Hebei050051，China；2．BaodingInstituteofAgriculturalScience，Baoding，Hebei071000，China)Abstract：InordertodetermineaccuratelyKanamy

5、cinscreeningmethodoftransgenicwheatseedbyseed—immersionmethod，inthispaper，winterwheatwasusedastheexperimentalmaterialtodiscussmainlytheinfluenceofknanamycinvolume，concentrationandgrainnumberonkanamycinscreening．Theresultsshowedthatkanamycinvolumeandgrainnumberwereasimp

6、ortantsaskanamycincon—centration．Moreover，it’Seffectivetoselectresistantseedsaccordingto“occupiedkanamycinamountofsinglegrain”within6O～180mg·L一rangeofkanamycinconcentrationroccupiedkanamycinamountofsinglegrain—kanamyeinconcentration×volume／grainnumber)．Basedonthismetho

7、dwegot84resistantplantsthroughtknamycinresistancesscreeningof412seeds，whichcamefrom7transgeneicprogenylines．76plantswerepositivebyPCRanalysis．Thecorrectrateofknamycinre一收稿日期：2013一O7—2O修回日期：2013-0915基金项目：转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08010011B)。作者简介：董福双(1979一)，女，硕士，助理研究员，主要从事作物转

8、基因、遗传生理及育种研究。E—mail：dongfushuang@126com。高义平为共同第一作者。通讯作者：王海波(1958一)，男，博士，研究员，主要从事作物转基因、遗传生理及育种研究。麦类作物学报第33卷sistancescr