药品微生物限度检查方法介绍

《药品微生物限度检查方法介绍》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、药品的卫生学检查方法介绍（北京市药品检验所戴红）1无菌室的质量管理药品的微生物限度检查药品的无菌检查2无菌室的要求位置选择面积大小洁净度采光紫外杀菌门人流物流地面墙面3无菌室的管理陈设尽量简单，仅放置必需用的仪器设备无菌室应每周和每次操作前用0.1%新洁尔灭擦拭操作台及可能污染的死角，室内无菌空气过滤器及紫外灯杀菌1小时。人员：肥皂洗手，0.1%新洁尔灭洗手，换无菌服、鞋，进入。操作必须符合无菌要求，穿好无菌服后，不能反复出入无菌间，手不能来回出入操作台。在每次操作完毕，同样用上述消毒溶液擦拭工作台面，除去空气湿气，用紫外灯

2、杀菌半小时。非无菌室工作人员不得进入，对外来维修人员要进行监督。缓冲间不得放杂物、培养箱等。定期对门、窗、墙面等消毒。定期检查洁净度情况。4洁净度的要求应在环境洁净度10000级局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须无菌。工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。5尘埃粒子洁净级别尘粒数/m3活微生数（个）/m3≥0.5um≥5um100级≤3,500≤0≤51000级≤350,000≤20,00≤100100000级3,500,000≤2

3、0,000≤500GB/T16294-1996沉降菌洁净级别个/（∮90mm.0.5h）100级≤110000级≤3100000级≤106菌种保存、复壮及管理保存原则保存方法复壮管理7菌种的保存原则挑选特征典型的纯菌菌落确定保存的合适菌体形态，凡能产生孢子或芽孢的微生物都用孢子或芽孢保存选择最适宜的保存方法进行保存定期对保存的菌种进行检查8菌种保存的常用方法琼脂斜面低温保存法甘油冷冻管保藏法半固体琼脂斜面低温保存法液体石蜡保存法超低温保存法（菌种）砂土9菌种的复壮分离纯化：琼脂平板分离、单细胞（菌体或孢子）的分离通过宿主复壮

4、淘汰退化理化因素诱变10菌种的管理专人管理，加锁保存在冰箱内，保存菌种的冰箱不得放置食品及易挥发性试剂及有机溶媒等定期有专人按操作规程进行传代接种菌种定期检查，发现染菌及变异现象应及时报告，研究处理。实验菌种不得任意带出使用致病菌时应及时通知保管人员，用后必须及时处理11菌种金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003]铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)[CMCC(B)10104]生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)[CMCC(B)64941]

5、白色念珠菌(Candidaalbicans)[CMCC(F)98001]黑曲霉(Aspergillusniger)[CMCC(F)98003]大肠埃希菌(Escherichiacoli))[CMCC(B)44102]枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)[CMCC(B)63501]12菌液的制备（1）接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤中，30～35℃培养18~24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5~10-7，使细菌数约为10~1

6、00cfu/ml。13菌液的制备（2）接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，23～28℃培养18~24小时，取此培养物1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5~10-7，使细菌数约为50~100cfu/ml。14菌液的制备（3）接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，23～28℃培养5～7天，加3~5ml0.9％无菌氯化钠溶液洗下霉菌孢子，吸取出菌液，取1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-4~10-6，使细菌数约为50~100cfu/ml

7、。15药品微生物限度检查方法介绍162005年版微生物限度标准的应用微生物限度检查法：检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。是判定药品受到微生物污染程度的重要指标，也是对生产企业的设备器具、工艺流程、生产环境和操作者的卫生状况进行卫生学评价的综合依据之一。药品的生产、贮存、销售过程中的检验，原料及辅料的检验，新药标准制订，进口药品标准复核，考察药品质量及仲裁等，除另有规定外，其微生物限度检查均以本标准为依据。检查项目：细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌的检查。172005年版微生物限度标准的分类1、制剂通则、

8、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂应符合无菌检查法的规定。2、口服给药制剂3、局部给药制剂3.1.用于手术、烧伤及严重损伤的局部给药制剂无菌3.2.眼部给药制剂：3.3、耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂3.4、阴道、尿道给药制剂3.5、直肠给药制剂3.6、其它局部给药184、含动物组织（包括