农杆菌介导的华南型黄瓜遗传转化体系的初步研究.pdf

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1、西南农业学报2014年27卷4期1656SouthwestChinaJournalofAculturalSciencesV01．27Nn4文章编号：1001—4829(2014)04—1656一o5农杆菌介导的华南型黄瓜遗传转化体系的初步研究杨宏，刘小俊，梁根云，房超，刘独臣，蔡鹏，李跃建’2(1．I~Jtl省农业科学院园艺研究所，蔬菜种质与品种创新I~t)tl省重点实验室，四川成都610066；2．农业部西南地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，四川成都610066)摘要：以华南型黄瓜‘二早子’、‘白丝条’、‘川绿2号’近叶柄部子叶为外植体，

2、对影响农杆菌介导的卡那霉素抗性遗传转化体系的主要因素如基因型、不定芽诱导最佳激素配比、筛选压、农杆菌侵染时间、农杆菌侵染浓度、共培养温度等进行试验，建立一个高效的黄瓜子叶遗传转化体系。结果表明，子叶分化再生能力‘川绿2号>‘二早子’>‘白丝条’。1．5ms／L6-BA+O．1mLTDZ+0．5mg／LABA能较好地促进‘二早子、‘白丝条子叶不定芽再生，而“川绿2号”在含1．5mg／L6-BA+0．5mg／LABA的MS培养基就能达到最佳分化率。筛选压与外植体分化能力有关，分化能力强的基因型需要较高的kan筛选压。OD600=0．3，侵染60min

3、，共培养温度26℃时有利于子叶的遗传转化。本研究中，‘二早子’的遗传转化率达到l5．46％，‘白丝条’的遗传转化率达到10．2％。关键词：华南型黄瓜；农杆菌；遗传转化；因素中图分类号：$642．2文献标识码：AEstablishmentofGeneticTransformationSystembyAgrobacteriumtumefaciensofCucumberYANGHongr，LIUXiao-junr，LIANGGen—yun．一，FANGChaor，LIUDu—chen。一，CAIPcngr，LIYueqian·‘(1．Horticulu

4、treInstituteofSichuanAcademyofA~culturalSciences，VegetableGermplasmInnovationandVailetyImprovementKeyLabo-ratoryofSiehuanProvince，SichuanChengdu610066，China；2．KeyLaboratoryofHorticulturalCropBiologyandGermplasmEnhancementinSouthwest，MimstryofAgriculture，SichuanChengdu610066，C

5、hina)Abstract：AtransformationsystemofcucumbercotyledonviaAgrobacteriumtumefacienswereestablishedbystudyingfactomincludinggeno-type，inducingmediumwitlldiferenthormones，screeningpressure，GV3101concentration，infectiontime，CO-cultivationtemperature，etc．Theresultsindicatedthat，MS+

6、1．5ms／L6一BA+0．1mg／LTDZ+0．5mg／LABAWClaggoodforadventitiousbudregenerationof‘erzaozi’and‘baisitiao’．Cotyledondiferentiationability‘chuanlv2’>‘cr'zaozi’>‘baisitiao’，genotypeofhi曲diferentiationabilityrequiredhighKanscreeningpressure．GV3101concentrationofOD60o0．3，60minforinfection

7、time，andCO—cultivationtemperaturewit}l26℃werethebesttransformationcondition．Thetransformationfi~iuencyof‘crzaozi’and‘baisitiao’were15．46％and10．2％．repectively．Keywords：Cucumber；Agro~umtl‘缸c；Transformation；Factor根癌农杆菌介导的遗传转化是黄瓜基因工程研性基因导人华南型黄瓜，通过对不同基因型材料、不究中的重要方法之一，已在华北型黄瓜中开展了抗同

8、芽分化培养基、卡那霉素筛选浓度、农杆菌侵染时除草剂、抗真菌引、耐冷川、抗虫引、抗病毒、间、农杆菌菌液浓度、共培养温度等影响抗性芽再生单性