光照、变性剂和pH对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)别藻蓝蛋白(APC)抗氧化活性的影响.pdf

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1、第36卷第2期海洋与湖沼VoI.36，No.22005年3月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAMar.，2005光照、变性剂和pH对钝顶螺旋藻（Spirulinaplatensis）别藻蓝蛋白（APC）抗氧化活性的影响!周站平刘鲁宁陈秀兰张熙颖张玉忠1）周百成T（山东大学微生物技术国家重点实验室济南250100）（T中国科学院海洋研究所青岛266071）提要采用不同光照条件、不同浓度的十二烷基硫酸钠（SDS）和脲，以及不同pH等条件处理钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白（APC），检测其光谱变化、生成及清除自由基能力的变化，对纯化的钝顶螺旋藻

2、别藻蓝蛋白（APC）在不同条件下的抗氧化活性进行了研究。结果表明，光照下，APC具有生成自由基的能力；黑暗中，APC却表现为清除自由基。SDS是一种很强的变性剂，1mmoI/L的SDS即可以使APC完全变性，能量传递功能丧失，光照下，APC生成自由基的能力丧失，自由基清除能力明显增强。1.6moI/L的脲作用后，只使APC部分变性，导致APC能量传递效率降低，光照下，表现为生成自由基的能力下降。随着脲浓度的升高（3.2moI/L、6.4moI/L），APC的结构逐渐变化，能量传递功能逐渐丧失，表现为生成自由基的能力逐渐下降，清除自由基的功能逐渐增强。A

3、PC具有较宽的pH稳定性，在pH为7—10的范围内非常稳定；当pH为11时，APC的结构已经发生变化。在日光灯下，pH为7时，APC具有生成自由基的能力；pH为8时，APC的荧光光谱虽然没有发生变化，但它们表现为清除自由基的能力。随着pH的增加，自由基清除能力也增强。因此，APC具有产生和清除自由基的双重功能，光照是调控自由基清除与产生的关键因素，并且只有APC具有能量吸收和传递功能时，才具有产生自由基的能力。脱辅基蛋白变性后，清除自由基的能力加强。关键词钝顶螺旋藻，别藻蓝蛋白，脱辅基蛋白，抗氧化剂中图分类号@51螺旋藻（SpirulinaSp.）是近

4、年来已经进行规合物，通过共价键连接在脱辅基蛋白上。藻胆素模化培养的单细胞螺旋丝状蓝藻，含有62%的氨可以作为自然色素和食品添加剂被广泛地应用于基酸，富含多糖和维生素。由于螺旋藻营养丰富，食品生产中，其结构与胆红素非常相似。胆红素并且富含多种药物特性，引起了人们的广泛关注。是一种高效的自由基清除剂（Stockeretal，1987），许多研究证明，螺旋藻及其抽提物可以抑制人类因此人们推测藻胆素也具有清除自由基的功能。和其他哺乳动物中肿瘤的生长；体外研究还发现，实验证明，藻胆蛋白在不同体系中都表现出清除螺旋藻的多糖可以增强细胞核内合成酶的活性，自由基和抑制

5、单线态氧的能力（Tapiaetal，加强DNA合成中的修复功能（Pangetal，1998）。1999），在体内和体外都可以防止脂质体过氧化，螺旋藻富含藻胆蛋白，藻胆蛋白是红藻和蓝保护DNA不受破坏（Hirataetal，1999，2000），同藻中光合作用的主要捕光色素蛋白，由脱辅基蛋时还具有消除炎症的功能，并且Pinero等（2001）白和藻胆素组成。藻胆素是一种开环的四吡咯化发现藻胆蛋白的抗氧化活性随其纯度的增加而增!国家高技术发展计划“863计划”资助项目，2002AA302213号；山东省自然科学基金资助项目，031070113号；山东省科技

6、发展计划资助项目，031070113号。周站平，硕士，E-maiI：zhouzhp@hotmaiI.com1）通讯作者，张玉忠，博士，教授，博士生导师，E-maiI：zhangyz@Sdu.edu.cn收稿日期：2003-11-17，收修改稿日期：2004-05-26180海洋与湖沼36卷加。另外，藻胆蛋白在各种体内体外实验模型中不加样品，同上操作处理，测定其对比吸光值都发现有抗炎症的作用（Romayetal，1998a，b；Ac（Absorbancecomparison）。GonzaIesetal，1999），这也可能与其抗氧化活性样品的自由基清除能

7、力SA%（ScavengingAc-有关。实验表明，藻胆蛋白清除自由基的能力主tivity）可表示为：SA%=（As-Ac）/As。要与藻胆蛋白中的藻胆素有关，而藻胆蛋白中的1.5APC的变性脱辅基蛋白的构象对藻胆素清除自由基的能力有用1mmoI/L、30mmoI/L、60mmoI/L、100mmoI/L何影响，至今尚未见报道。作者从藻胆蛋白的结SDS，1.6moI/L、3.2moI/L、4.8moI/L、6.4moI/L脲和构入手，深入研究了藻胆蛋白的构象与自由基产pH为7、8、9、10、11的缓冲液处理APC，然后测定生和清除能力之间的关系。吸收光

8、谱、荧光光谱和自由基清除能力。1材料与方法2结果1.1藻种2.1APC的分离纯化钝顶螺旋藻（S