实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数的检测

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1、实验十一水中细菌总数和大肠菌群数的检测一、实验目的1、学习并掌握水体细菌学的检验2、学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法二、实验原理1、细菌总数的测定：采用稀释平板法（混合平板法）2、大肠菌群数的测定：采用多管发酵法（MPN法）大肠菌群以大肠杆菌为主，能在37℃48h内发酵乳糖产酸、产气。大肠菌群数可作为判断水源或食品污染的指标。最大概率数法：对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算出样品中的微生物数目。三、实验材料1、水样2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、

2、3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基（带指形管）、伊红美兰固体培养基四、实验方法（一）水中细菌总数的测定（混合平板法）1、样品采集和稀释自来水、纯净水、饮料作原样、10-1、10-2三个稀释度污水作10-1、10-2、10-3三个稀释度2、取3个稀释度样品各1ml于平皿中，再倒入50℃左右牛肉膏蛋白胨培养基约15ml，轻轻转动混合均匀。凝固后37℃倒置培养。每个稀释度作3个重复。细菌总数＝同一稀释度平板上菌落平均数×稀释倍数（最好在30~300个之间）（二）水中大肠菌群数的测定1、初发酵实验在3倍浓缩乳糖培养基中加入3个梯度样品各10ml（5个重复），混匀37℃培养24h。2、平板分离不

3、产酸不产气和不变浑浊阴性产酸产气或仅产酸阳性菌落为深紫黑色，具金属光泽或紫黑色不带金属光泽或淡紫红色中心较深3、结果计算根据阳性管数查表得大肠菌群数。划线接种于伊红美兰平板，37℃培养24h五、思考题1、记录每组样品中所测得的细菌总数和大肠菌群数。2、典型的大肠杆菌群菌落特征是什么？