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《脂肪酸的色谱保留时间规律与质谱特征研究及其在食品分析中的应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第35卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第7期2007年7月ChineseJournalofAnalyticalChemistry998～1003脂肪酸的色谱保留时间规律与质谱特征研究及其在食品分析中的应用3吴惠勤黄晓兰林晓珊黄芳朱志鑫马叶芬(中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室,广州510070)摘要用石油醚提取食品中的脂肪,经甲酯化反应后,采用HP288(100m×0.25mm,0.33μm)弹性石英毛细管柱分离脂肪酸甲酯的同系物及异构体,GC/MS法测定。研究了不同链长脂肪酸的同系物及异构体的气相色谱出峰顺序,得到其保留时间规律;研究了不同
2、脂肪酸的质谱断裂规律,选择3个特征离子来鉴定脂肪酸成分。建立了3个特征离子确定脂肪酸碳数及双键数目,色谱保留时间规律确定脂肪酸顺反异构体及双键位置异构体的方法。本法无需标准品即可快速测定脂肪酸同系物及异构体的含量,适用于脂肪酸组成的研究;及油脂、食品中脂肪酸,特别是反式脂肪酸的测定。关键词脂肪酸,同系物,顺反异构体,保留时间规律,质谱特征离子,气相色谱/质谱,食品1引言脂肪酸是人体不可缺少的营养成分之一,与健康密切相关的多不饱和脂肪酸有防治心血管疾病的作用。但研究表明,反式脂肪酸(trans2fattyacids,TFAS)却起反作用,它降低了人体中有益的高密度胆固醇的含量,
3、而使有害的低密度胆固醇含量增加,导致心脑血管疾病、动脉阻塞硬化、糖尿病、乳腺癌和[1]老年痴呆症,还可能影响儿童生长发育和神经系统健康。丹麦、美国、巴西等国已相继出台对食品中反式脂肪酸的限量规定。然而,目前尚未出台反式脂肪[2]酸的检测标准,也没有理想的方法测定食品中的反式脂肪酸。[3～6]脂肪酸的分析已有许多文献报道,但对脂肪酸顺反异构体的分析仅见有油酸及亚油酸的报[7,8]道,而且还需要昂贵的脂肪酸甲酯标准品进行定性。本研究采用气相色谱/质谱技术初步建立了食[9]品中反式脂肪酸的测定方法,并在文献[9]基础上进一步研究了不同链长的脂肪酸同系物、顺反异构体、双键数目及位置不
4、同的异构体的气相色谱保留时间规律,研究了脂肪酸的质谱断裂规律,根据质谱特征离子确定脂肪酸的组成,结合色谱保留时间规律鉴定脂肪酸同系物及各种异构体,建立了无需标样可测定脂肪酸含量的新方法。本方法操作简便、快捷、准确、可靠,适用于脂肪酸组成的研究及油脂、食品中反式脂肪酸含量的测定。2实验部分2.1仪器及工作参数2.2.1GC条件色谱柱:HP288(100m×0.25mm,0.2μm)弹性石英毛细管柱,柱温170℃,恒温2min,以10℃/min程序升温至200℃,保持32min。进样口温度250℃,载气He,柱前压265kPa,分流比10∶1,进样量0.5μL。2.2.2MS条件
5、EI离子源,电子能量70eV,质量扫描范围29～450u,四极杆温度150℃,离子源温度230℃,电子倍增器电压2300V,GC/MS接口温度280℃,标准质谱图库Wiley275.L。2.2.3分离与鉴定酯交换反应得到的脂肪酸甲酯经气相色谱石英毛细管柱分离,质谱仪记录质谱图,得到GC2MS总离子流图。根据质谱图及标准品的色谱保留时间确定各种脂肪酸异构体成分,并用面积归一化法测定其相对含量。2006210217收稿;2007202205接受3E2mail:wu_hui_qin@tom.com第7期吴惠勤等:脂肪酸的色谱保留时间规律与质谱特征研究及其在食品分析中的应用9992.
6、2脂肪的提取和甲酯化衍生准确称取脂肪5g,以石油醚为溶剂,用索氏提取法提取出脂肪,挥干溶剂,准确称出总脂肪质量,并计算出样品中总脂肪的含量。按文献[10,11]方法将脂肪酸甘油酯转化为脂肪酸甲酯。取约0.1g提取出的脂肪,置于10mL容量瓶中,加入1mL乙醚/正已烷,摇匀,然后加入1mL无水甲醇,摇匀,再加入1mL0.8mol/L氢氧化钾2甲醇溶液,摇动5min,加水至刻度,静置分层,取上层溶液进行GC/MS测定。3结果与讨论3.1脂肪酸的色谱分离及保留时间规律3.1.1顺反异构体的分离由于反式和顺式脂肪酸只是立体结构不同,其物理、化学性质非常相似,用常用的30mFFAP或P
7、EG220M毛细管柱难以将顺、反式脂肪酸分开。故实验选专用的HP288(100m×0.25mm,0.2μm)弹性石英毛细管柱,摸索出合适的分离条件,可将顺、反式脂肪酸完全分开,并得到脂肪酸顺反异构体的色谱出峰规律:反式脂肪酸先出峰,顺式脂肪酸后出峰(如图1所示)。3.1.2双键位置不同的异构体分离研究了含图1C18∶2顺反异构体标样的GC/MS总离子流色谱图双键位置不同的脂肪酸顺反异构体的分离条件,Fig.1GC/MSTICofcis2,trans2C18∶2顺、反式28,112十八碳二烯酸,顺、反式2
