高通量药物筛选的及其在中国的发展趋势（ X页）.doc

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1、高通量药物筛选的及其在中国的发展趋势高通量筛选的含义近年来，由于自动化技术特别是机器人的应用，在新药研究屮出现了高通量筛选技术(Highthroughputscreening,HTS),该技术将化学、基因组研究、生物信息,以及自动化仪器等先进技术，有机组合成一个高稈序、高白动化的新模式，从而创造了发现新药的新程序。由于该技术具有快速、高效等特点，因而成为新药发现的主要手段。简而言Z,高通最筛选技术是将多种技术方法有机结合而形成的一种新技术体系，它以微板形式作为实验工具载体，以白动化操作系统执行实验过程，以灵敏快速的检测仪器采集实验数据，以计算机对数以千计的样品

2、数据进行分析处理，从而得出科学准确的实验结果和特色效用。英国学者AlanD研究提示，一个实验室采用传统的方法，借助20余种药物作用靶位，1年内仅能筛选75000个样品；1997年高通量筛选技术发展初期，采用100余种靶位，每年可筛选100万个样品；1999年高通量筛选技术进一步完善后，每天的筛选量就高达10力种化合物。高通量药物筛选主要由五个部分组成：1・H动化操作系统它主要是指计算机控制的实验室白动化T作站，又称实验室机器人。该工作站可以代替人工进行白动加样、稀释、转移、洗脱、混合、温孵、检测等操作,使实验遵守程序化，减少人工误差，结果更准确可靠。在国外，高

3、通量自动化筛选系统主要由制药企业构建和使用。高通星白动化筛选系统建立以示，主要课题是如何保障不断需求的人量的筛选资源的问题。因此，发达国家的人型制商企业从企业竞争和白少发展的战略利益出发，纷纷建立高通量白动化的筛选系统，同时，投以巨资通过合作或共同研究等方式，谋求获得发展中国家的大量资源。2.高灵敏度的检测系统该系统是为了适应HTS而出现的新检测仪器。由于HTS在96孔或更多孔的微板屮进行实验，样品量小，因而要求仪器灵敏度高，而且能够对96孔微板进行快速检测。现在用于HTS的检测仪器已可以进行可见光、紫外光、荧光比色,也可以进行同位素放射活性测定和生物发光、化

4、学发光等多方面的测定，使现有的体外实验方法多数可用于HTS。2.1分光光度法近年来，美、英两国研究人员在高通量筛选检测屮，努力进行了光学测定方法的研究，建立了大星的非同位素标记测定法，如用分光光度检测法筛选蛋白酪氨酸激酶抑制剂、组织纤溶酶原激活剂等，均获得成功。为了适应高通量药物筛选，许多公司都生产了具备计算•机接口并能对多孔板进行同时检测的分光光度计。以MolecularDevice公司的spectra190为例，它采用8条光导纤维同时对8孔进行测定。测定波长以2nm为间隔，可以在190nm-850nm间进行选择。对未知物质，可在该范围内进行扫描以确定其特征

5、吸收光谱。因此，大大增加了建立模型的多样性。检测数据以不同文件格式输出，可用随机软件或通用数据处理软件进行处理。方便、快速、准确、H动化程度高。分光光度法高灵敏仪器同白动化操作系统的连接，使得基于紫外、可见光谱的高通量药物筛选模型成为主要模型种类。2.2放射性检测技术美国学者GanieSM在高通量药物筛选研究屮，应用放射性测定法，特别是亲和闪烁(SPA)检测方法，使在96孔板上进行的样木量实验得到发展。该方法灵敏度高，特异性强，促进了高通量药物筛选的实现，但存在环境污染问题。2.3荧光检测技术美国学者GiulianokA研究认为，采用FIJPR(fluorom

6、etricimagingreader)荧光检测法(MolecularDevices),可在短时间内同时测定荧光或化学发光的强度和变化，对测定细胞内钙离了流及测定细胞内pll和细胞内钠离了流等，是一种非常理想的高效检测方法，目前，FLIPR已成为业内公认的高通量药物筛选的黑马。现代药物筛选的速度与该项技术的发展和此仪器的更新紧密相关，是高通量药物筛选的必需设备。2・4多功能微板检测系统：近年来多功能酶标仪技术取得突飞猛进的发展。其功能可涵盖光吸收、化学发光、荧光、荧光偏正、荧光能量共振转移和alphascreening等方面,在药物筛选种得到广泛的应用。其检测体

7、系可低至几微升样品量，通量可扩充到1536孔板。此项技术尤以MolecularDevices公司更为突出。MolecularDevices公司是专业的酶标仪技术开发和生产公司，其推出的酶标仪型号最全，最经典。她的每一型号的酶标仪推出时,均为市场上的第一台，始终引领着酶标仪的发展方向。目前该公司正在研发下一代产品，将來用户能在获得数据的同时，也可以看得到标本的图像。3・分了、细胞水平的高特异性体外筛选模型指用于检测药物作用的实验方法。由于HTS要求反应总体积小，而且反应具有较高的特异性和每攵感性，因此对于筛选模型也要求较高，常用的筛选模型都建立在分子水平和细胞水

8、平，观察的是药物与分子靶点的相互作用,