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1、关于结直肠腺癌组织Grp78表达及意义作者：刘芳邢晓明李玉军赵洁【摘要】目的研究葡萄糖调节蛋白78(Grp78)在结直肠腺癌组织屮表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学PV法检测87例结育肠腺癌组织(其屮18例同时具有腺瘤组织)及配对正常黏膜组织Grp78的表达。结果结育肠腺癌组织Grp78蛋白表达水平显著高于正常黏膜组织(Z=-8.140,P0.05)。结论Grp78在正常黏膜组织、腺瘤组织、癌组织中的表达呈逐渐增高的趋势，Grp78可能参与了结直肠腺癌的发生过程。【关键词】结直肠腺癌；蛋白质Grp78；免疫组织化
2、学[ABSTRACT]ObjectiveTostudytheexpressionofglucose-regulatedprotein78(Grp78)inhumancolorectalcarcinomaanditsrelationshipwithclinicalandpathologicalfeatures・MethodsTheexpressionofGrp78wasdetectedbyimmunohistochemistryPVtechniquein87colorectalcareinomaspecimens,ofwhich,
3、18showedadenomasimultaneously,andinmatched-pairnormalmucousmembrane.ResuItsTheexpressionofGrp78inthecancertissuewassignifictintlyhigherthanthatofthenormalcolorectalmembrane(Z=-8・140,P0・05）.ConclusionTheexpressionofGrp78proteinshowsagradualincreasetendencyintheorderof
4、fromnormaltissue,adenomatocarcinomtuGrp78isinvolvedinthedevelopmcntofcolorectaicarcinoma.［KEYWORDS］Colorectalcarcinoma;Protein;Grp78;Immunohistochemistry簡萄糖调节蛋白78（Grp78）X名免疫球蛋白重链结合蛋白（Bip）,是葡萄糖调节蛋白家族成员Grp78的功能很多，除作为分了伴侣参与蛋白质的折叠和转运外，它还是内质网上的一种应激蛋白，在低糖、低氧、低C&2+等应激状态下大量表
5、达以维持内质网的稳定，保护细胞［1,2］。近年来研究发现，Grp78在多种肿瘤组织屮呈高表达，与肿瘤的发生有关［3〜6］。木研究应用免疫组织化学方法检测了Grp78在结直肠腺癌组织屮的表达情况，并探讨了其与结直肠腺癌临床病理特征的关系。1材料与方法1.1标本收集青岛大学医学院附属医院病理科2005年1月〜2008年4刀石蜡包埋结直肠腺癌组织及其配对正常黏膜组织87例,其中18例同时具有腺瘤组织。87例病人中男60例，女27例；年龄38〜78岁（＜60岁者43例，＞60岁者44例）。肿瘤直径V5cm者57例，＞5cm者30例。病理
6、学类型均为腺癌，参照WHO癌细胞分化分级标准：低分化（III级）38例,屮分化（II级）35例，高分化（I级）14例。病理切片证实无肠周淋巴结转移者50例，已发生转移者37例。所有标木均经40g/L屮性甲醛固定，常规石蜡包埋，4um厚连续切片。1.2检测方法采用免疫组织化学PV法,第一抗体为羊抗人Grp78（Santa-Cruz,sc-1051）多克隆抗体,工作浓度为1：200；第二抗体为兔抗羊IgGo严格按照说明书操作，用已知Grp78阳性乳癌组织作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。1.3结果判断C；rp78主要表达在细胞
7、浆内，细胞膜上也有少最表达，呈棕黄色细颗粒状。根据DAB显色结果，rfl两位病理医师在光学显微镜下先示观察，进行染色强度以及染色细胞比例的评分。染色强度得分标准为：完全阴性者0分，淡黄色1分，黄色2分，棕黄色3分；阳性细胞百分比评价标准为：<5%者0分,5%〜24%者］分,25%〜49%者2分,50%〜74%者3分,275%者4分。Grp78的表达指数以染色强度分数X染色细胞比例分数表示［7］。1.4统计学处理采用配比（对）秩和检验（两样木Wilcoxon和多样本Friedman法）来比较各纽.织之，间Grp78表达水平的寿异，
8、多样本Z间的两两比较采用q检验。结直肠腺癌病人不同性别、分化程度、浸润深度等与Grp78表达Z间的关系采用两个样本的秩和检验（两样本Mann-WhitneyU法）。所有数据统计均在SPSS13.0软件包上进行。2结果2.1各组织中Grp78的表达C；rp78蛋H
