禾谷丝核菌原生质体的制备及遗传转化体系的探索

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1、江苏农业学报(Jiangsu．，．ofAgr．Sci．)，2013，29(6)：1313—1319http：／／www．Jsnyxb．corn任向荣，李伟，孙海燕，等．禾谷丝核菌原生质体的制备及遗传转化体系的探索[J]．江苏农业学报，2013，29(6)：13131319doi：10．3969／j．issn．1000-4440．2013．06．020禾谷丝核菌原生质体的制备及遗传转化体系的探索任向荣，李伟，孙海燕，陈一t；~g-2，于汉寿(1．南京农业大学生命科学院，江苏南京210095；2．江苏省农业科学院植物保护研究所，江苏南京210014)摘要：禾谷丝核菌侵染小麦引起的纹枯病

2、是一种严重的土传病害，已成为中国小麦高产稳产的重要威胁。为进一步开展禾谷丝核菌的致病机理等研究，通过对酶种类、菌丝酶解时间及渗透压稳定剂等因素进行原生质体制备条件的优化，进一步尝试了PEG-原生质体转化和土壤农杆菌介导的转化方法进行禾谷丝核菌的转化。建立了禾谷丝核菌高效、稳定的原生质体制备体系，通过形态学、生长速率及致病性的比较发现原生质体再生菌株和原始菌株之间差异不显著。多次尝试两种转化方法，没有获得禾谷丝核菌的遗传转化子。原生质体制备体系的获得为禾谷丝核菌遗传转化、原生质体融合等体系的建立奠定了基础。关键词：禾谷丝核菌；原生质体；再生菌株；遗传转化中图分类号：$435．12文献

3、标识码：A文章编号：1000-4440(2013)O6—1313-07ProtoplastpreparationandgenetictransformationofRhizoctoniacerealisRENXiang．rong，，LIWei，SUNHai．yan，CHENHuai．gu，YUHan．shou(1．CollegeofLifeSciences，NaAgriculturalUniversity，Nang210095，China；2．InstituteofPlantProtection，JiangsuAcademyofAgriculturalSciences，Nanjin

4、g210014，China)Abstract：WheatsharpeyespotcausedbyRhizoctoniacerealisVanderHoeven，isasoil—bornedisease，whichhassignificantlythreatenedthehi【ghandstableproductionofwheatinChina．InordertostudythepathogenesisofR．cerealis，theenzyme，theenzymolysistimeandtheosmoticstabilizerforprotoplastpreparationwer

5、eoptimized．TwomeansthePEG—protoplastandAgrobacteriumtumefaciensmediationwereemloyedtotransformR．cerealis．AneficientandstablesystemofprotoplastpreparationforR．cerealiswasdeveloped，andtherewasnodifferencebetweenregeneratedstrainsandoriginalstraininmorphology，speedofgrowthandpathogenicity．Notrans

6、formantwasobtainedbybothmethods．TheprotoplastpreparationsystemforR．cerealisprovidedabasisforgenetictransformation，protoplastfusionandSOon．Keywords：Rhizoctoniacerealis；protoplast；regeneratedstrain；genetictransformation由禾谷丝核菌(RhizoctoniacerealisVanderHo-麦高产、稳产的重要威胁¨。J。该菌通常以菌丝和菌even)引起的小麦纹枯病已成为中国

7、小麦主产区小核的形态习居于土壤中，自然条件下只发现无性世代I3。国内外学者对禾谷丝核菌的田间快速检测、收稿日期：2013-04-27化学防治及生物防治等方面做了大量研究。但基金项目：国家自然科学基金项目(30900928)；小麦产业技术体系对该病原菌的流行学、基因之间的交流和致病机理建设项目(nycytx-03)等方面的研究远远落后于其他一些病原菌，其主要作者简介：任向荣(1987一)，女，山东巨野人，硕士研究生，从事植物病原因是到目前为止尚未建立禾谷丝核菌有效的遗传