专题21微生物的培养与应用.ppt

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1、课题1微生物的实验室培养了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。一、课题目标：掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：三、技能目标：课题1微生物的实验室培养㈠.微生物的类群微生物原核类:真核类非细胞类：细菌、支原体、放线菌、蓝藻酵母菌、霉菌、食用菌真菌：原生生物：显微藻类、原生生物（如：草履虫、变形虫等）病毒、类病毒、朊病毒一.微生物基础知识特点：结构简单,个体多数十分微小(光学显微镜或电子

2、显微镜才能看到)，繁殖迅速1.细菌的形态细菌主要是以二分裂的方式进行增殖（如右图）2.细菌的繁殖3.细菌的菌落⑴.定义：单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。几种菌落及其形态几种菌落及其形态⑵.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。⑶.功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。问：菌落在生态学上属于什么单位？种群4.病毒的结构:由核酸和蛋白质构成。病毒的结构吸附注入合成释放组装5.病毒的繁殖病毒的增殖一般可分五

3、个阶段，即：吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放6.病毒的营养方式：寄生1、定义为人工培养微生物而制备的、提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。2、分类天然培养基1）按培养基中化学成分分：合成培养基半合成培养基(二)、培养基液体培养基2）按物理形态分：固体培养基半固体培养基、常用的固体培养基:琼脂固体培养基.②、微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落.液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长back半固体培养基：(是否运动)无动力有动力(弥散)固体培养基：菌落主要用于微生物的分离

4、、计数等主要用于工业生产主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等基础培养基3）按培养基功能分：选择培养基鉴别培养基1)鉴别培养基指在基础培养基上加入某些化学物质，与培养基中某些微生物的代谢产物起反应，产生某种明显的特征性变化，从而区别微生物的培养基。例：伊红-美蓝培养基，用来鉴别大肠杆菌。如果有大肠杆菌，其代谢产物（有机酸）就会与伊红-美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。鉴别培养基2)选择培养基在培养基加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。功能：筛选所需要菌种例1:在培养基中

5、加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌的生长，从而分离出酵母菌和霉菌例2:在培养基中加入高浓度的食盐，可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可选出该菌。选择培养基(3)常见微生物的分离实例：①真菌、霉菌：用含青霉素的培养基分离②金黄色葡萄球菌：用含高浓度食盐的培养基分离③固氮微生物：用无氮培养基分离④自养型微生物：用无机碳源的培养基分离⑤光合细菌：用无机碳源的培养基在无氧而有光照的环境中分离。⑥厌氧型和兼性厌氧型微生物：用普通培养基在无氧条件下分离。⑦分离导入了目的基因的受体细胞：用含有青霉素等抗

6、生素的培养基3、培养基内所含的基本物质(1)、水(2)、碳源(3)、氮源(4)、无机盐（三）.微生物需要的营养物质及功能(2)碳源可作为碳源的物质有:含碳无机物:、、含碳有机物：蛋白质脂肪酸不同微生物所利用的碳源不同异养型微生物的碳源为自养型微生物的碳源为碳酸盐碳酸氢盐二氧化碳糖类（主要）含碳有机物（有机碳）含碳无机物（无机碳）(3)氮源可作为氮源的物质有:含氮无机物：、、、含氮有机物：蛋白胨牛肉膏尿素固氮微生物所利用的氮源是氮气氨气硝酸盐氨盐氮气(1)、pH值如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性(2)、

7、特殊营养物质----?如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素(3)、氧气的含量如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件（4）、培养基内所需的其他条件生长因子包括维生素、氨基酸、碱基----酶和核酸的组成成分（四）、无菌技术1、获得纯净培养物的关键:2、无菌技术包括的四大方面3、消毒与灭菌(1)消毒：概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。包括芽孢和孢子吗？方法:煮沸消毒法巴氏消毒法:如牛奶的消毒化学药剂消毒:酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等紫外线消毒(不包括芽孢和孢子)防

8、止外来杂菌的入侵芽孢、孢子有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.（2）灭菌概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法：a灼烧灭菌b干热灭菌c高压蒸汽灭菌灼烧灭菌微生物的接种工具(接种环、接种针)或