转OsCYP2基因水稻后代的遗传检测及生理特性-论文.pdf

《转OsCYP2基因水稻后代的遗传检测及生理特性-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、一98一江苏农业科学2014年第42卷第5期马凌霄，雷闯，刘红双，等．转OsCYP2基因水稻后代的遗传检测及生理特性[J]．江苏农业科学，2014，42(5)：98—100转OsCYP2基因水稻后代的遗传检测及生理特性马凌霄，雷闯，刘红双，马建，马景勇(吉林农业大学农学院，吉林长春130118)摘要：对转OsCYP2基因的吉农大808水稻的T4代进行PCR检测，同时进行田间调查以及生理生化特性的测定，以观察吉农大808水稻的转基因T4代与对照非转基因吉农大808水稻的差异。结果表明，吉农大808水稻的转基因T4代植株中仍含有OsCY

2、P2基因，且在0．15％NaCO溶液模拟盐碱胁迫的条件下，其发芽率明显高于对照品种；吉农大808水稻的转基因T4代植株在田间的分蘖数明显高于对照，生育期延长；在生理指标方面，吉农大808水稻转基因Td代植株的抗逆性高于对照品种。关键词：转基因水稻；OsCYP2基因；遗传检测；生理测定中图分类号：s511．01文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)05—0098—03转基因生物技术的迅速发展为水稻新品种培育提供了一3min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min，30个个崭新的重要途径，它可以克服生殖隔

3、离，实现物种间遗传物循环；72℃延伸10min。扩增产物用2％琼脂糖凝胶统计目质的转移，对我国水稻品种的遗传改良起到了划时代的推动的条带J。作用。我国在转基因水稻的培育方面进行了大量的探索和研1．2．3转基因水稻的农艺性状检测调查转基因水稻的株究，目前已经培育出了大量抗虫、抗病、抗除草剂以及具有其高、穗长、千粒质量、结实率等农艺性状并与对照进行比较。他优良品质性状的转基因水稻一，但是对于转基因植物后1．2．4转基因水稻生理生化指标的测定依据PCR检测结代的稳定性以及农艺性状、生理表现等方面需要进一步观察。果，对呈阳性的株系进行生理生

4、化指标的测定，测定方法依据本研究以转OsCYP2基因水稻的T4代作为试验材料，对转基张治安等的试验。因植物后代的稳定性以及农艺性状、生理表现等方面进行测2结果与分析定，以期为转OsCYP2基因水稻的进一步研究提供参考依据。2．1转基因水稻的发芽率1材料与方法发芽试验进行7d后，对各试验组的发芽率进行统计，并1．1试验材料与对照的发芽率进行比较。由表1可见，在0．15％NaCO，溶试验用水稻为吉林农业大学水稻育种课题组通过前期研液模拟盐碱胁迫的条件下，吉农大808转基因水稻的发芽率究获得的转基因吉农大808的T4代植株，对照为非转基吉

5、农均高于对照非转基因品种，1cm以上的芽数也高于对照大808。于2012年在吉林农业大学农学院的水稻试验田内品种。分别种植转基因吉农大808的T4代植株、对照植株。表1转基因吉农大8O8与对照的发芽率比较1．2试验方法1．2．1转基因水稻的发芽率挑选100粒饱满、均匀一致的种子，称量千粒质量后予3O℃浸种24h，用0．2％HgCl：杀菌，洗净后置于垫有滤纸的培养皿中，加入0．15％NaCO溶液模拟盐碱胁迫]，于3O℃恒温光照条件进行发芽试验，每天用处理液冲洗处理种子以保持盐碱胁迫状态。1．2．2转基因水稻的分子检测在水稻插秧后剪取其

6、幼嫩叶片，使用改良的CTAB法提取DNA，采用35S启动子特异引物组合(F：5一ATGGA1’ITGTAGAGAGAGAC一3，R：5一CTAGGAGAGCTFGCCGCAGT一3)进行扩增检测。20扩2．2转基因水稻的PCR检测增体系：各110p．moL／mL引物，1100ng／DNA模对选取的5个转基因水稻样品进行PCR检测，观察目的板，10L2×PCRmix，7LddH20。扩增程序：94℃预变性基因是否仍存在于植株中，结果如图1所示。由结果可以看出，对照植株未显示阳性，其余水稻品种均在205bp处有条带，检测结果呈阳性，表明

7、经过多代种植，目的基因仍存在于收稿日期：2013—09—17作者简介：马凌霄(1989一)，女，内蒙古赤峰人，硕士研究生，从事水试验水稻中。稻遗传育种研究工作。E—mail：mix200702@126．corn。2．3转基因水稻的农艺性状通信作者：马景勇，教授，从事水稻遗传育种研究工作。E—mail：由表2对转基因水稻与对照农艺性状的比较可见，转基99n2@163．corn。因植株的株高、穗长、千粒质量、结实率与对照差别不大，但是江苏农业科学2014年第42卷第5期批有应用潜力的转基因材料。然而尽管转基因水稻的遗传改良已取得较大进展

8、，但外源基因的稳定遗传、高效表达及目目的基因的沉默等遗传机理仍有待进一步研究。本研究瓮Q通过对转OsCYP2基因的T4代水稻进行初步研究，探究了其部分特征特性，而其他特征则需要进一步探究。参考文献：[1]卢宝荣，傅强，沈志成．我国转基