不同色泽大豆蛋白分离得率的比较-论文.pdf

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1、DOI:10.13963/j.cnki.hhuxb.2014.05.004第12卷　第5期红河学院学报Vol.12　No.52014年10月JournalofHongheUniversityOct.2014不同色泽大豆蛋白分离得率的比较卜婷（陇东学院生命科学与技术学院，甘肃庆阳745000）摘　要：碱溶法提取具有色泽差异的不同种类大豆蛋白后，考马斯亮蓝法测定粗提液的蛋白质含量，丙酮抽提并干燥制得大豆蛋白干粉，微量凯氏定氮法测定干粉中的蛋白质含量并进行比较，确定蛋白含量及蛋白得率最高的大豆类型．结果表明不同色泽的大豆蛋白质含量不同，

2、绿色大豆的蛋白可溶性及蛋白含量较高，但蛋白干粉得率较低．关键词：色泽；大豆蛋白；分离得率　　中图分类号：Q81文献标识码：B文章编号：1008-9128（2014）05-0019-02大豆籽粒蛋白质含量较高且氨基酸种类齐全，为同一品系，种皮色泽不同．营养丰富，是人类重要的植物蛋白来源．大豆蛋白1.2试剂具有良好的溶解性、乳化性、起泡性、持水性和凝过氧化氢；盐酸；氢氧化钠；95%乙醇；硫酸[1-2]胶性等特性，被广泛用于食品加工．钾；无水硫酸铜；丙酮；甲基红；溴甲酚绿；考马众多学者研究了影响大豆蛋白提取得率的因斯亮蓝；人血清标准蛋白

3、．[3-6]素，大多集中在对生产条件的控制．但对实际1.3主要设备生产来说，即使在相同条件下仍常出现产品得率722S型可见光分光光度计，上海棱谱仪器仪表及品质的差别．这可能与大豆自身的特点如蛋白有限公司；M20粉碎机，安捷来国际股份（香港）[2]溶解性和酸沉等相关．有限公司；凯氏定氮仪，福斯华(北京)科贸有限公目前栽培的大豆是从黑种皮的野生大豆进化演司；真空干燥箱，南京福如机械设备有限公司．变而来,具有黄、绿、黑、褐、双等丰富的种皮颜色，大豆种皮色与大豆种子外观以及商品质量有密2实验方法[7]切关系．费家骍等对不同种皮色的大豆脂肪

4、含量2.1碱溶法提取蛋白[6,11]进行测定发现脂肪含量由高到低依次为：褐、黄、参照李桂菊等使用的方法并做了适当改进．[8]黑、青、双色．刘秀贤等对云南省8个栽培地、10取3g大豆粉用0.2%NaOH溶液30ml室温下搅拌抽提个种皮色的豆科植物木豆籽实进行蛋白质及淀粉含15min，4000r/min离心15min，取上清液即为蛋白粗量分析测定,结果表明各栽培地、种皮色间淀粉含量提液．[9]有一定差异．对于种皮色泽与蛋白质含量的关系，2.2考马斯亮蓝法测定粗提液蛋白浓度[8-10][12][13]目前研究较少，说法不一．参照李宁和张

5、志良等所采用的方法．取适河北处于我国五大大豆主产区的春大豆区，本量蛋白粗提液样品,加入5mL考马斯亮蓝G-250试剂研究选用产自河北的黄、绿、黑三种不同色泽的大并摇匀，放置5min后，在595nm波长下比色记录吸豆作为实验材料，严格控制实验条件，测定蛋白含光度值．根据所测吸光度值从标准曲线上查得蛋白量及提取蛋白得率并进行比较，为大众选择高蛋白质含量．每个样品重复三次，取平均值．类大豆产品提供参考依据．2.3粗蛋白含量计算粗蛋白含量(mg/100g)=Y×Va/(Vx×W)×0.001×1001材料与方法式中：Y为大豆蛋白粗提液浓度

6、(µg/ml)；Va为1.1材料大豆蛋白粗提液的总体积(ml)；Vx吸光度值测定时所大豆品系为冀黄13号，产自河北，购自庆阳市用蛋白粗提液稀释液的体积（ml）；W为用于蛋白西峰区种子公司．黄色大豆、绿色大豆、黑色大豆提取的大豆粉质量(g)．收稿日期：2013-12-22基金项目：陇东学院青年科技创新项目（XYLK1304）作者简介：卜婷（1985-），女，甘肃庆阳人，讲师，硕士，研究方向：生物技术。20红河学院学报　2014.5/生命科学研究2.3丙酮法制取大豆蛋白干粉表1不同色泽大豆粗蛋白含量比较取适量蛋白粗提液，加入等体积预冷

7、的丙酮，参数大豆种类黄大豆绿大豆黑大豆Y73.5180.5074.616mol/L的HCl调pH值至4.5~5.0，于4000r/min离心Va23.4323.6724.6115min，收集沉淀物，并用少量丙酮洗涤沉淀两次．Vx111此沉淀物即为大豆蛋白，用滤纸吸干、平铺在表面W333皿上，放入40℃烘箱干燥2小时后称重并计算蛋白干粗蛋白含量（%）57.4263.5162.84粉得率．蛋白干粉得率(％)=(提取的大豆蛋白干粉质黄色大豆、绿色大豆、黑色大豆的粗蛋白含量量／用于蛋白提取的大豆粉质量)×100%．分别为57.42%、63

8、.51%、62.84%，亦是绿色大豆的2.4微量凯氏定氮法测定干粉中的蛋白质含量粗蛋白含量最高．这与费家骍等1983年对不同粒色[14-17]大豆与蛋白质含量关系的研究结果基本一致[8]．参照文献进行，最后计算样品中蛋白含量．样品中蛋白含量（%）=