Wnt／β-catenin信号转导通路与肺腺癌顺铂耐药作用机制研究-论文.pdf

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1、生肿瘤防治杂志2014年6月第21卷第11期CHINJCANCERPREVTREAT，June2014，Vo1．21No．11《前沿报道／论著lWnt／』3一catenin信号转导通路与肺腺癌顺铂耐药作用机制研究高原。刘赞张秀伟贺佳妮潘泳岐郝凤霞谢玲玲李庆昌1．中国医科大学病理教研室，辽宁沈阳1,100012．辽宁中医药大学病理教研室，辽宁沈阳110032【摘要】目的：探讨Wnt／~-catenin信号转导通路在肺腺癌顺铂耐药中的分子作用机制。方法：体外常规培养人肺腺癌A549细胞和其顺铂耐药A549／DDP细胞，取对数生长期的细胞用于实验。采用MTT法检测A549和A

2、549／DDP细胞对顺铂的IC5o；采用AnnexinV／PI法和Hoechst33342染色法检测顺铂处理后2种细胞的凋亡率；采用蛋白质印迹法检测2种细胞中p—catenin和Survivin的表达；采用siRNA干扰沉默catenin的表达，检测A549／DDP细胞的Ic5。值、细胞凋亡率及-catenin和Survivin的表达。结果：顺铂对A549／DDP细胞的IC5o值为(28．984±1．404)mol／L高于A549细胞的(5．888_4-0．338)I~mol／L，t一27．696，P<0．001；20t~mol／L顺铂诱导A549／DDP细胞凋亡率为(

3、21．75±0．96)，显著低于A549细胞的(39．38-_4-0．88)，t一23．474，P<0．001。A549／DDP细胞中G—catenin蛋白的表达为1．890±0．060，显著高于A549细胞的1．063±0．035，t一20．595，P<0．001；在A549／DDP细胞中Survivin蛋白表达量为1．1O7士0．061，明显高于A549细胞的0．503±0．025，t一15．814，P<0．001。RNAi技术沉默catenin蛋白耐药性(14．615±0．939)／lmol／L，显著低于未沉默B—cateninA549／DDP细胞的(28．984

4、4-1．404)mol／L，t一14．732，P<0．001；RNAi技术沉默catenin蛋白细胞凋亡率为(37．57±0．64)，显著高于未沉默p—cateninA549／DDP细胞的(21．75±0．96)，t一23．699，P<0．001；RNAi技术沉默J}catenin蛋白下游靶基因Survivin蛋白的表达为0．527±0．065，显著低于A549／DDP组的1．027_-4-0．025和瞬时转染阴性对照siRNA组的1．033±0．040，F一116．944，P<0．001。结论：抑制Wnt／~一catenin信号转导通路的活性可以降低A549／DDP细

5、胞对顺铂的耐药性。【关键词】8一连环蛋白；Survivin；癌，非小细胞肺；顺铂；耐药中华肿瘤防治杂志，2014，21(11)：805—810MechanismofWnt／P-cateninsignaltransductionpathwaymediatingdrugresistancinlungadenocarcinomaGAOYuan，。，LIUZan，ZHANGXiu—wei，HEJia—ni，PANYong—qi，HAOFeng—xia，XIELing—ling，LIQing—chang1．InstituteofPathology，ChinaMedicalUniv

6、ersity，Shenyang110001，P．R．China2．DepartmentofPathology，CollegeofBasicMedicalSciencesofLiaoningUniversityofChineseTraditionalMedicine，Shenyang110032，P．R．China[ABSTRACT]OBJECTIVE：ToinvestigatemoleculemechanismontheWnt／13一cateninsignaltransductionpathwaymedi—atingdrugresistaneinlungadenocar

7、cinoma．METHODS：HumanlungadenocarcinomaA549cellsanditscisplatinresist—anceA549／DDPceilswereculturedinvitroandthecellsinlogarithmgrowthperiodwereused．MTTassaywasusedtodetermineIC50valuesofcisplatininA549andA549／DDPcells．AnnexinVanalysisusingflowcytometryandHoechst33342stain