松花粉中总黄酮含量测定方法的研究-论文.pdf

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1、科技·探索·争鸣Sc科ience&技Tech视nology界Vision项目与一松花粉中总黄酮含量测定方法的研究陈胜发彭修娟2(1．杨凌职业技术学院，陕西杨凌712100；2．陕西国际商贸学院，陕西咸阳712000)【摘要】目的：建立一个适合松花粉中总黄酮含量测定的方法。方法：采用AI(N03)，一NaNO2-NaOH和A1C1，两种显色法测定松花粉中总黄酮的含量，并分别考察了两种方法对测定结果的影响。结果：AICI显色法更适宜于松花粉中总黄酮的含量测定。结论：采用紫外可见分光光度法，以芦丁为对照品、A1C1，显色，适合松花粉中总黄酮含量测定。【关键词】松花粉

2、；总黄酮；显色法；紫外可见分光光度法松花粉药名松花、松黄，为马尾松Pinusmassoniana、油松P．于25ml容量瓶中．用30％乙醇补足至6．0m1．按照2．2．1节操作．并在tabulaeformis或同属种植物的干燥花粉Ⅲ刘嘉宝等口对松花粉的黄酮510nm下测定吸光度。以芦丁对照品溶液浓度x．mg．ml一)为横坐标，类成分进行了分析，鉴定出松花粉中黄酮类化合物成分，主要为黄酮和吸光度(v)为纵坐标进行线性回归，得线性回归方程、相关系数分别黄酮醇类，其次是二氢黄酮醇类。目前．总黄酮的含量测定方法主要有Y=8．6046x+0．0273．R2=9889，n

3、=6由此可知．芦丁对照品溶液在分光光度法、薄层色谱扫描法、高效液相色谱法、超f界流体色谱法和O．00788—0．0473mg．ml的浓度范围内呈现良好的线性关系．毛细管电泳法等几种主要的方法但在测定总黄酮含量时．这些方2-3．2A1C[3显色法法需要较多的黄酮化合物对照品分别精密量取芦丁对照品溶液10．0．1．0，2．0，3．0，4．0和5．0ml，分本文针对松花粉中的总黄酮．选用紫外分光光度法用不同显色体别加30％乙醇至5m1．按照2．2．2节操作．并在415nm处测定吸光度。系进行含量测定．建立一种准确度较高的光度分析方法以芦丁对照品溶液浓度(x．mg．m

4、l)为横坐标，吸光度(Y)为纵坐标进行线性回归．得线性回归方程、相关系数分别为v=34．087x+0．04，1实验材料与仪器R2=0．9936．n=5由此可知：芦丁对照品溶液在0．00788—0．0394mg．ml‘。TU一1950紫外可见分光光度计(北京普析通用)；TE124S分析天平的浓度范围内呈现良好的线性关系(德国赛多利斯)；KQ2200DA超声清洗机(昆山市超声仪器有限公司)；3结果DHG一9070B电热鼓风干燥箱f上海琅歼实验设备有限公司1：松花粉购于陕西省药材市场．经西安盛兴中药饮片有限责任公司3．1结果(检)：3．1_1供试品中总黄酮含量测定芦

5、丁对照品，购自中国药品生物制品检定所，批号：100080—精密量取供试品溶液0．5ml，按照2．2．1节操作，测定其吸光度，根200707(供Uv法测定．本品含量为92．5％。1据回归方程(见图1)计算出样品溶液中总黄酮含量为28．6％。精密量取供试品溶液0．5m1．按照2．2．2节测定样品溶液的吸光度．经回归方2实验方法程(见图2)计算出样品溶液中的总黄酮含量为17．6％。2．1总黄酮的测定2．1．1对照品溶液精密称取芦丁对照品19．7mg．用60％乙醇定容于50ml容量瓶中，即得芦丁对照品储备液(0．394mg．ml)。精密量取5ml芦丁对照品储备液，置于

6、25ml容量瓶中，用60％乙醇稀释定容，即得芦丁对照品溶液I(0．0788mg．ml)。精密量取25ml芦丁对照品储备液，置于50ml容量瓶中．用60％乙醇定容，即得芦丁对照品溶液II(0．197rag．ml)。精密称取芦丁对照品10．1mg．用60％乙醇定容于25ml容量瓶中．得芦丁对照品溶液Ⅲ(0．404mg．ml)2．1．2供试品溶液准确称取2O．0g松花粉，置于250ml圆底烧瓶，加入12倍(p)的准曲线80％乙醇溶液，加热回流提取2h，过滤，残渣中再加入1O倍体积fp)的80％乙醇，加热回流提取2h，过滤。合并两次滤液，回收乙醇，浓缩液用蒸馏水定容至

7、250ml静置沉降24h．精密量取上清液10m1．用60％乙醇定容至100m1．即得样品溶液2．2测定方法2．2．1AI(NO3)rNaNO一NaOH显色法分别精密量取对照品溶液Ⅱ、对照品溶液Ⅲ和供试品溶液各1．0m1．置于25ml容量瓶中．以30％乙醇补足至6．Ora1．加入5％的NaNO：和10％的AI(NO)3溶液各lml，加入4％的NaOH溶液10ml，摇匀放置5rain．以30％乙醇定容．于510nm下测定2．2．2A1C1显色法分别精密量取对照品溶液I、对照品溶液Ⅲ和供试品溶液各1．0ml，置于10ml容量瓶中，以30％乙醇补足至5．0ml，摇匀．

8、再加入4ml1％的AIC1溶液，用30