人去浆膜层胆囊组织蛋白质表达谱的建立与分析-论文.pdf

《人去浆膜层胆囊组织蛋白质表达谱的建立与分析-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、肝胆胰外科杂志第26卷第1期VOI_26NO．12014年1月JournalofHepatopancreatobiliarySurgeryJan．2O14·实验研究·人去浆膜层胆囊组织蛋白质表达谱的建立与分析钱昌林，季福，刘骅，沈志勇，蔡端。(1．上海交通大学医学院附属仁济医院普外科，上海201112；2．复旦大学附属华山医院普外科上海200040)[摘要]目的采用蛋白质组学技术分析胆固醇结石患者与正常人去浆膜层胆囊组织蛋白表达谱的差异，通过质谱技术鉴定差异表达蛋白，为胆石成因提供实验依据。方法提取胆固醇结石患者和

2、正常人去浆膜层胆囊组织蛋白，构建相应的双向电泳蛋白质表达谱并应用ImageMaster图像分析软件获得差异蛋白点信息，采用质谱鉴定差异表达蛋白质。结果胆固醇结石患者与正常人去浆膜层胆囊组织差异蛋白质表达谱均获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱，差异表达谱结果显示l9个蛋白点在两者之间差异较大，质谱成功鉴定l1个，1个重复。其中Tropomyosin4(TPM4)、Transgelin(sm22)、Transthyretin(TTR)、CyanometRhb1．1、Haptogl0bin—relatedprotein

3、precursor、ChainA，thestructureofHolotypehumanCu，Znsuperoxidedismutase在结石组中表达上调，Myosin、Peroxiredoxin3(Prdx3)、Hypotheticalprotein、Tcellreceptoralphachain在结石组中表达下调。TTR、TPM4、SM22、Prdx3蛋白差异为Westernblotting和RT—PCR所验证。结论初步建立了胆固醇结石患者与正常人去浆膜层胆囊组织的差异蛋白质表达谱，分析、鉴定并验证了差异蛋白点

4、，为胆固醇结石形成的关键调控蛋白质研究提供实验依据。[关键词]胆固醇结石；双向凝胶电泳；比较蛋白质组学[中图分类号]R322．48[文献标识码]A[文章编号]1007—1954(2014)一0033—06Establishmentandanalysisofexpressionprofileofserosa-removedgallbladdertissueproteinQIANChang—lin，JlFu，LIUHua，eta1．DepartmentofGeneralSurgery，RenjiHospital，Sha

5、nghaiJiaotongUniversity,SchoolofMedicine，Shanghai200112，ChinaObjectiveTouseproteomictechnologytoanalyzediferenceofserosa-removedgallbladdertissueproteinexpressionprofilebetweencholesterolgallstonepatientsandnormalpeopleandtousemass-spectrometrictechniquetoiden

6、tifydiferentiallyexpressedproteins，andtoprovideexperimentalevidenceforcausesofgallstones．MethodsTheserosa—removedgallbladdertissueproteinfromcholesterolgallstonepatientsandnormalpeoplewereextracted，thecorrespondingtwo—dimensionalelectrophoresisproteinexpressio

7、nprofileswereconstructedandimageanalysissoftwareImageMasterwasappliedtoobtaininformationofdifferentproteinspots，mass—spectrometrictechniquewasusedtoidentifydiferentiallyexpressedproteins．ResultsTheserosa-removedgallbladdertissueproteinexpressionprofileofbothch

8、olesterolgallstonepatientsandnormalpeopleobtainedtwo-dimensionalelectrophoresispattemswithhighresolutionandreproducibility，anddiferentialexpressionprofilesshowedthat19proteinspotsv