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1、#∃∀%∋)∗%∀∗0《食品与发酵工业》以月!∀%&(!+,,−./〕高活力糖化酶发酵技术的研究乌卜敏辰郑建丰李剑芳,,2+3+2341,,2+31江苏省无锡启蒙生物高技术研究所无锡县无锡轻工业大学食品工程系无锡56−4、、摘要本文对糖化酶产生菌八.+3,的诱变育种方法发酵产酶工艺摇瓶培养基配方及小。,、型自动发酵罐条件等进行了系统的研究实验结果表明菌种自然分离紫外线诱变以及.78,)处理等的配合作用可显著提高产酶量和转化率出发菌株的产酶活力从9:55;<(提高到+:55;间。,帅已巧突
2、变菌株发酵,5)按最佳的培养基配方和发酵工艺条件采用=+−∋>酶活力6),。可达5555;闹以上对提高我国的糖化酶活力具有重要的现实意义关健词糖化酶,黑曲霉,发醉技术,、近年来国内在提高糖化酶活力及降低二菌种,,生产成本等方面作了许多研究工作并不断黑曲霉菌株Α.+3,由无锡轻工大学中。央研究所酶工程实验室提供。以+有新的研究成果报道但目前我国糖化酶生Α.3,为出一∃5),,、产厂家的平均酶活仍在55;司左右由发菌株经多次紫外线照射自然分离及,,Δ。于生产原料及能源价格的不断上涨使生产.78处理最
3、终获=.ΒΧ+:突变株发酵酶,糖化酶的经济效益日益下降甚至有部分生活力在摇瓶筛菌培养基上达+:55∋);&∃以产厂家被迫停产、转产。大幅度地提高糖化酶上。活,,、力提高酶收得率降低生产成本已迫在眉三培养基0睫。+试管料面培养基江苏省无锡启蒙生物高技术研究所在总采用查氏培养基、鼓皮浸出液培养基。,,结前人研究的基础上经多年探索先后在糖20摇瓶筛菌培养基化酶的生产菌、生产工艺、后提取工艺等方面采用玉米粉+60:?,豆饼粉60:?,熬皮00。+,,。取得了突破性的进展在发酵配方总固形物。?玉米浆25?
4、无机盐,,为6:?发酵时间为+−5>条件下发酵酶活60获曲抱子培养基,0,0。6555),+,+235力超过;耐比国内平均发酵水平提高熬皮水一调ΕΦ为,0了6倍生产成本下降了6≅6?。本文拟将30种子培养基对糖化酶发酵技术的这一方面内容作一报采用玉米粉−?,豆饼粉205?,鼓皮道。+05?,无机盐。四、摇瓶方法材料和方法,于:55耐三角瓶中装人培养基:5耐在,,、、∃%<下灭菌25而冷却接人斜面鼓曲或一原料,,6∋∋#;而玉米粉、淀粉、豆饼粉、熬皮、玉米浆、无液体种子培养物置于旋转摇床,。Χ下
5、机氮源、无机盐等。振幅2:Δ62培养一定时间五、2:Γ发酵罐试验0《》以记!∀#∃∀%%&∋(!)∗%#&∀∗+,,−.∋2食品与发酵工业,于中2:5Μ:5发酵罐中装入发从表+和表2可看出对于Α.+3,菌ΔΔ,、,,,酵培养基+3Γ经灭菌冷却接人+茄子瓶株通风量大小对糖化酶的活力影响很大通鼓曲抱子或摇瓶液体种子。在一定温度、搅拌风量大酶活单位高,通风量小酶活力低Ο对于、,,转速通风量条件下发酵+−5>左右待残糖=>Π4+:菌株通风量大小对糖化酶的活力0,,5:?,小于二次测定酶活力单位不
6、再上升影响较小但培养基浓度超过2−?时酶活,。。,及ΝΦ回升时即可放罐力不再增加主要是由于玉米粉浓度高培养六、分析方法基中不溶性杂质过多,增加了发酵醒的稠度,+0糖化酶的酶活力降低了发酵液内的溶解氧。当采用淀粉代替按工业用酶制剂行业标准测定。玉米粉作为碳源时,由于淀粉杂质含量少,最0,2ΝΦ值浏定高配方浓度可达6:?酶活力超过2655∋);采用精密声试纸测定。而。60总糖、还原糖二、培养基哪值对产酶的影响采用斐林试剂法测定。我们研究了不同起始ΕΦ对菌株产糖化30酸度酶的影响,采用筛菌培养基,在灭
7、菌前分别调0+。5∃∃;+,。以耐发酵滤液消耗<∋Γ.伽不同的ΕΦ值试验结果如图+所示(∀ΓΒΗΙΓ卜∀Γ(ϑ(Ι。未毫升数表示,几‘ΚΚ‘ΚΛ内卜结果与讨论一、发酵通风,对产酶的影晌分别通过改变摇瓶装液量及摇瓶培养基,浓度两种方法来考虑突变株=>犯一+:对053,、。通风量的要求结果如表+表2所示表+不同装液%对产醉的影晌’563−−≅ΘΕΦ图+发酵起始ΝΦ对菌株产酶的影响装液量1耐465:595+55+25注Ρ1Σ+534纵座标为酶活力);耐菌Α.+3,9:55≅2:5−55536556+
8、2:),,株1;(∃4从图+可见起始ΝΦ值低于3时原料=入《4+:+:2:5+:555+3,+3≅:5+32:5不,,能充分糖化致使菌体生长缓慢产酶能力)1;(∃4,,弱Ο−当值高于时菌体易自溶致使菌Ρ,#,ΕΦ注采用筛菌培养基转速2:∋;<&62℃培养,ΟΝΦ3−,−>。体过早老化在一范围内州值对菌种产酶影响不大。表2不同培养基浓度对产酶的影晌、、三发酵培养基浓度的影响∃9222−6563,采用淀粉为碳源配成不同总固形物浓嘿找1?41?41?41?41?4,,度的发酵培养基摇瓶发酵+−∋>结果
