金黄色葡萄球菌熔解曲线分子分型体系的建立及应用-论文.pdf

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1、·2354·国际检验医学杂志2014年9月第35卷第17期IntJLabMed，September2014，vOl_35．No．17·检验技术与方法·金黄色葡萄球菌熔解曲线分子分型体系的建立及应用王冰，李迎慧，扈庆华，林一曼，石晓路，邱亚群，贺连华，陈妙玲，吴平芳，许舒乐(深圳市疾病预防控制中心，广东深圳518055)摘要：目的建立金黄色葡萄球菌熔解曲线分子分型体系，应用于金黄色葡萄球菌食物中毒快速溯源。方法根据文献合成金黄色葡萄球菌VNTR位点的相应引物，用于检测已知PFGE型别的金黄色葡萄球菌，从中筛选出4个分辨力较高的位点。在此基础上建立熔解曲线分子分型体系，检测59株分离自

2、食物中毒的金黄色葡萄球菌。结果熔解曲线分子分型体系具有良好的精密度，其批内重复性实验的标准差(s)为0．03～0．05。C，批间重复性实验的s为0．04～0．06℃，日间重复性实验的s为0．0440．06℃。同时，熔解曲线分子分型体系能将59株金黄色葡萄球菌分为19个型别，包括11个流行克隆和8个散发克隆，Sire—pon相关系数为0．9164。结论建立的体系快速、灵敏度高、重复性好，能应用于金黄色葡萄球菌食物中毒的快速溯源和筛查。关键词：金黄色葡萄球菌；熔解曲线；分子分型DOI：10．a969／j．issn．1673—4130．2O14．17．038文献标识码：A文章编号：l67

3、3—4130(2014)17-2354—03EstablishmentandapplicationofamoleculartypingsystemofSfnphylOcocclsaureusbasedonresolutionmeltingWangBing，LiYinghui，H“Qinghua，LinYiman，ShiXiaolu，QiuYaqun，HPLianhua，ChenMiaoling．WuPingfang．XuShule(ShenzhenCenterforDiseaseControlandPrevention，Shenzhen，Guangdong518055，China)

4、Abstract：ObjectiveToestablishamoleculartypingsystemofS口户^zDc0cc“sauregsbyusingresolutionmeltingforfood—poi—soningfasttracing．MethodsPrimersweredesignedandsynthesizedaccordingtotheliteratureofVNTRinStaphylococ~“0“一reus，andwereusedtoperformmoleculartypingonthestrainswhichhaddetectedbyPFGE，then4t

5、ypesofVNTRswerewithhigherdiscriminatorypowerwereselected．Onthisbasis，weestablishedamoleculartypingsystemforthedetectionof59Staphy—lococcusaureusisolatedfromfoodpoisoning．ResultsThemoleculartypingsystemhasgoodprecisionfordetection．Thestandarddeviation()ofwithin—hatchrepetitiveexperimentswere0．0

6、3—0．05C，between-batchrepetitiveexperimentswere0．04—0．06。C，betweendayrepetitiveexperimentswere0．04—0．06℃．Atthesametime。the59strainsof5口Z0c0fcaureusweredividedintol9typeswhichwere11epidemicclonesand8sporadicclones．ThecorrelationcoefficientofSimpsonwas0．9164．ConclusionThemoleculartypingsystemforS

7、f口p^Z0c0cc“saureusbasedonresolutionmeltingwassimple，fastandrepeatable．Itcanbeap—pliedtofasttracingandscreenofSp￡oc0cc乱saureusinfoodpoisoning．Keywords：Sfn^Zof0ffaureus；resolutionmelting；moleculartyping金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌)在自然界中普遍存在，食物中毒快速溯源提供