贵州地方稻种黎平杂边禾成熟胚再生体系建立及遗传转化-论文.pdf

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1、分子植物育种，2014年，第12卷，第4期，第652—658页MolecularPlantBreeding，2014，Vo1．12，No．4，652—658研究报告ResearchReport贵州地方稻种黎平杂边禾成熟胚再生体系建立及遗传转化郭振0曾晓芳赵德刚∞1贵州大学山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室，贵阳，550025；2贵州大学生命科学学院，农业生物工程研究院贵州省农业生物工程重点实验室，贵阳，550025；3绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地(贵州大学)，贵阳

2、，550025通讯作者，dgzhao@gzu．edu．ca摘要本研究以黎平杂边禾成熟胚为材料，建立其组培再生体系，并对农杆菌介导黎平杂边禾的遗传转化影响因素进行研究。结果表明：最佳愈伤组织诱导培养基为N6基本培养基附加2．0mg／L2,4一D，愈伤组织诱导率达83．3％；最佳愈伤组织分化培养基为：N6+6一BA3．0mg／L+KT0．5mg／L+NAA0．5mgm，分化率达93．51％；农杆菌介导遗传转化的侵染用菌液浓度OD6oo为0．6、侵染时间15min、共培养3d、除草剂草丁膦(PPT)筛

3、选压为3．0mg／L。分子鉴定结果证明获得黎平杂边禾转基因植株，为对其进行定向矮化遗传改良奠定基础。关键词黎平杂边禾，成熟胚，再生体系，农杆菌，遗传转化EstablishmentofRegenerationSystemofMatureEmbryoandGeneticT1ransfIormrnatilonb0yusingA~e7robtactert"um-med0i1atedinG(JuUilzZhl'loOuULocalRKilcCeVariety‘‘Lipingzabianhe’’GuoZhe

4、nZengXiaofang1,2,3ZhaoDegang，2，1KeyLaboratoryofPlantResourcesConservationandGermplasmInnovationinMountainousRegion(GuizhouUniversity)，MinistryofEducation，Guiyang，550025；2GuizhouKeyLaboratoryofAgro—Bioengineering，InstituteofAgro-Bioengineering，Guizhou

5、University，Guiyang，550025；3TheStateKeyLabofGreenPesticideandAgriculturalBiologicalEngineering(GuizhouUniversity)，Guiyang，550025Correspondingauthor，dgzhao@gzu．edu．cnDOI：10．13271~．mpb．012．000652AbstractGuizhoulocalricevariety“Lipingzabianhe”wereusedast

6、heexplants，theplantregenerationofma—tureembryowasstudiedandthefactorswhichafectthee珩cientofgenetictransformationviaAgrobacterium．mediatedwereresearched．TheresultssuggestedthattheoptimalmediumforcallusinducewasN6th2．0me4L2,4一D，theinduceratioreached83-

7、3％．TheN6witll6一BA3．0mg／L_}．KT0．5mg／L+NAA0．5mg／Lacquiredthebestcallusdiferentiationratewhichwas93．51％．TheAgrobacterium．mediatedgenetictransformationwascarriedonundertheOD~_-0．6，PPT3mg／L，and15minutesinfecting,CO—culture3d，weobtainedthetransgenicplantso

8、fGuizhoulocalricevariety“Lipingzabianhe’theobtainingoftransgenicplantslayafoundationforGuizhoulocalricevariety“Lipingzabianhe”directeddwarfgeneticimprovement．KeywordsLipingzabianhe，Matureembryo，Regenerationsystem，Agrobacterium，Genetictransformation水~