光温条件对烟叶唇柱苣苔叶片离体培养的影响-论文.pdf

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1、现代农业科技2014年第11期林业科学光温条件对烟叶唇柱苣苔叶片离体培养的影响黄赛潘梅戚华莎王景飞吕德任(海南省农业科学院园林花卉研究所，海南海口571100)摘要以烟叶唇柱苣苔叶片为外植体，MS为基本培养基，研究了光照强度和温度对烟叶唇柱苣苔叶片离体培养的影响，以期筛选出各培养阶段最佳光照强度和温度。结果表明，叶片不定芽诱导的最佳光照强度是1000Ix，最佳温度为28℃，40d不定芽诱导率95．83％；不定芽增殖和生根的最佳光照强度是1500lx，最佳温度为28℃，40d不定芽增殖倍数迭7．24倍，生根率100．0o％，平均生根数多达21-33条。关键词烟叶唇柱苣苔；温

2、光条件；叶片；不定芽；组织培养中图分类号Q949．778．4；Q943．1文献标识码A文章编号1007-5739(2014)11-0155—02烟叶唇柱苣苔(ChiritaheterotrichaMen"．)是苦苣苔科唇叶片(约0．5cmxO．5cm)以叶背接入MS+6一BA0．1mg／L+NAA柱苣苔属多年生草本，生于海拔约430Ilfl的山谷林中或溪0．1mg／L培养基翻，置于温度28qC、不同光照强度的培养室边石上川，是海南省特有的野生花卉，具有极大的开发潜力。中，培养40d后统计叶片不定芽诱导率和平均不定芽数。汤正辉对烟叶唇柱苣苔叶片不定芽的分化及生根进行了(2)

3、温度对叶片不定芽诱导的影响。取无菌植株小叶片研究121，但有关光照及温度等环境条件在其离体培养中的影(约0．5cmxO．5cm)以叶背接入MS+6一BA0．1mg／L+NAA0．1响未见有报道。本试验以烟叶唇柱苣苔无菌叶片作为试验材mg／L培养基上，置于光照强度1500Ix、不同温度的培养室料，研究了不同光照强度和温度对叶片不定芽的分化、增殖中，40d后统计叶片不定芽诱导率和平均不定芽数。以及生根的影响．以期筛选出各培养阶段最为合适的光照1．3．3不定芽的增殖。强度和温度(1)光照强度对不定芽增殖的影响。将单个不定芽接1材料与方法入MS+6一BA0．5mg／L+NAA0．

4、1mg／L培养基中，置于温度1．1试验材料28qC、不同光照强度的培养室中，培养40d后统计不定芽植株采自海南省保亭县，取幼叶作为外植体材料。供试增殖倍数。植物生长调节剂为6-BA(6-苄基腺嘌呤)、NAA(萘乙酸)。(2)温度对叶片不定芽增殖的影响。将单个不定芽接入基本培养基为MS。MS+6一BA0．5mg／L+NAA0．1mg／L培养基中．置于光照强度1．2试验设计1500lx、不同温度的培养室中，40d后统计不定芽增殖倍数。以MS为基本培养基，根据试验目的添加植物生长调节1．3．4生根培养。剂6-BA和NAA，附加白糖30g／L、卡拉胶9g／L，灭菌前pH(1)光照

5、强度对不定芽生根的影响。将高度达到1．2cm值为5．8，配制分装后，于温度121oC、压力0．14MPa高温的不定芽接入MS+NAA0．5mg／L培养基中．置于温度28℃、高压下灭菌20min。材料接种后移入培养室，光照强度设置不同光照强度的培养室中，培养30d后统计不定芽生根率、1000、1500、2000lx等3个处理，温度设置25、28、31℃3生根数、株高。个处理，光照时间8h／d，每个处理接种8袋，每袋3个材料，(2)温度对不定芽生根的影响。将高度达到1．2cm的不3次重复，定期观察记录，培养40d后统计结果。定芽接入Ms+NAA0．5mg／L培养基中，置于光照

6、强度1500Ix、1．3试验方法不同温度的培养室中培养，30d后统计不定芽生根率、生根1．3．1无菌材料的建立。将烟叶唇柱苣苔的幼嫩叶片在自数、株高和最长根。来水中洗去污物，用棉花蘸洗洁精液擦拭叶片两面，冲洗干1．4统计方法净后移入超净工作台，先用75％酒精浸泡10s，再用0．2‰计算公式为：不定芽诱导率(％)=诱导出芽叶片数／接种HgCI2溶液浸泡3min，无菌水冲洗3次，最后用2％次氯酸叶片数xl00，平均不定芽数=不定芽总数／诱导出芽叶片数．钠溶液浸泡15rain，无菌水冲洗5次。将叶片切成1cmx1cm不定芽增殖倍数=培养40d不定芽总数／接种不定芽数，生见方的小

7、块，以叶背朝下接种于MS+6一BA0．5mg／L+NAA根率(％)=生根植株数／接种植株数xl00，生根数=植株生根总数／生根植株数。试验结果均进行方差分析，F测验显著后用0．1mg／L培养基上。接种15d后，叶面开始膨大隆起。25d开始有小芽点萌动，40d在叶片边缘、主叶脉基部和叶面处均新复极差法(SSR)进行多重比较，统计结果均为99％水平。2结果与分析分化出不定芽。取不定芽叶片作为研究试验材料。2．1不定芽的诱导1．3．2不定芽的诱导。(1)不同光照强度对烟叶唇柱苣苔叶片不定芽诱导的影(1)光照强度对叶片不定芽诱导的影响