不同载体固定化产脂肪酶发酵性丝孢酵母的比较-论文.pdf

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1、第33卷第4期大连工业大学学报V0I．33NO．42014年7月JournalofDalianPolytechnicUniversityJu1．2014文章编号：1674—1404(2014)04—0246—04不同载体固定化产脂肪酶发酵性丝孢酵母的比较孙艳红，王珊，侯英敏，孙玉梅(大连工业大学生物工程学院，辽宁大连116034)摘要：选择活性炭、硅胶G、大孔树脂DM一130为载体，采用吸附培养的方法将发酵性丝孢酵母细胞固定化，确定了固定化的适宜条件。通过比较适宜条件下固定化细胞的脂肪酶活力，筛选出固定化效果较好的吸附载体为活性炭。结果表明，在培养基中添加10g

2、／L40目活性炭，接人体积分数为1O％的液体种子，于3O℃、160r／min吸附培养48h的固定化效果较好，获得的固定化酶活力可达110．32U／g。关键词：发酵性丝孢酵母；脂肪酶；细胞固定化；载体中图分类号：TQ925．6；Q814．2文献标志码：AComparisonoflipase—producingTrichosporonfermentansimmobilizedinvarioussupportsSUNYanhong，WANGShan，HOUYingmin，SUNYumei(SchoolofBiologicalEngineering，DalianPoly

3、technicUniversity，Dalian116034，China)Abstract：Lipase—producingTrichosporonfermentanswereimmobilizedinactivecarbon，silicagelGandmacroporousresinDM一130respectivelybyadsorptioncultivation．Theoptimumimmobilizationconditionsweredetermined．Activecarbonwasselectedasthebetterimmobilizationsu

4、pportbycomparingthelipaseactivityofTrichosporonfermentansimmobilizedinvarioussupports．Trichosporonfermentansat10％inoculationcouldbeefficientlyadsorbedin1．0gactivecarbonat30℃and160r／minfor48hby100mIsubmergedfermentationin250mLshakingflaskandtheactivityofimmobilizedenzymewasover110．32U

5、／gcel1．Keywords：Trichosporonfermentans；lipase；cellimmobilization；support0引言酶的酶活力提高了两倍多，酶的固定化效率约为3．5u／(mg·h)l6]。活性炭比大孔树脂对蛋白酶脂肪酶(EC3．1．1．3)能在油水界面上催化酯的吸附固定效果好，固定率可达61．95，固定的水解和醇解、酯合成、酯交换、内酯合成及高聚物蛋白酶对蛋白质的去除率达到44．30_7]。以氨合成等反应，被重点研究和较广泛应用l1]。与游基化硅胶固定化葡萄糖氧化酶较游离酶酶活力、离酶和固定化酶相比，固定化全细胞在经济性、使热稳

6、定性、贮存稳定性上均有提高]。用稳定性及易行性等方面均具有显著优越_2]。本文分别以活性炭、硅胶G、大孔树脂DM一130常用的细胞固定化方法有包埋法、吸附法、共固定发酵性丝孢酵母细胞，研究了固定化培养条价法以及交联法等。吸附法以其操作简单、处理件，并对不同载体的固定化效果进行比较。条件温和、酶的损害作用小以及吸附剂可反复使用等优点广泛地应用于细菌、酵母菌、真菌细胞的1材料与方法固定化j。活性炭、硅胶和大孔树脂是常用的固定化载体，具有较大的孑L径和比表面积，理化性质1．1材料稳定，价格低廉及吸附能力强]。大孔弱碱性离1．1．1菌种子交换树脂D301固定化假丝酵母脂

7、肪酶比游离发酵性丝孢酵母(Trichosporonfermentans)收稿日期：2013-09—02．作者简介：孙艳红(1988一)，女，硕士研究生；通信作者：孙玉梅(1962一)，女，教授第4期孙艳红等：不同载体固定化产脂肪酶发酵性丝孢酵母的比较247CICC1368，购自中国食品发酵工业研究院。式中：细胞质量一风干的固定化细胞质量一发酵1．1．2培养基制备液中载体添加量，g。斜面培养基(g／I)：葡萄糖2o，蛋白胨10，酵1．2．5脂肪酶活力测定母粉1O，琼脂20，自然pH，0．1MPa、121℃灭菌将50mL橄榄油加入到150mI4聚乙烯15min。醇溶

8、液中，用榨汁机处理3mi