ST细胞的鉴定及种子细胞库的建立-论文.pdf

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1、J.SHANXIAGRIC.UNIV.(NaturalScienceEdition)雹—目lI墨嘲学报(自然科学炳)2o14.34(4003I58ST细胞的鉴定及种子细胞库的建立彭丽英。,章伟建。,张华弟,徐平。,钱忠辉,潘杰,朱永军。,张春玲。,蒋凤英。,何锡忠,徐伟林,张婉华(i.上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海201106;2.上海佳牧生物制品有限公司,上海2011063.上海市动物无害化处理中心,上海201415;4.上海科立特农科(集团)有限公司,上海201106)摘要:为确保疫苗生产的的安全性,对不同代次的ST细胞进行鉴定。从中国兽医药品监察所引进第4O代的ST细胞,传至8O代

2、,每个代次各冻存3瓶于液氮中。细胞复苏后,对细胞的特征、纯净度、核型、致瘤性及对细胞的毒性进行了研究。结果表明,sT细胞系呈现梭状上皮细胞,生长状态良好,细胞的生长速度基本一致;细菌、霉菌、支原体、外源病毒的检测均为阴性;染色体数目为19对且核型相同;无致瘤性;对豚鼠和兔子无毒性;病毒在ST细胞系中稳定地繁殖,TCID5。≥10。。,HI≥1:32。建立ST细胞的种子细胞库,为开展猪细小病毒疫苗的生产提供安全保障,也为猪伪狂犬病疫苗及猪细小病毒弱毒苗的研究提供基础理论依据。关键词:ST细胞系;细胞库;生物学特性中图分类号:858.28文献标识码:A文章编号:167卜8151(2014)04—0

3、336—03IdentificationandEstablishmentofSTCellsBankPengLiying,ZhangWeijian。,ZhangHuadi’,XuPing’,QianZhonghui,PanJie~,ZhuYongjun’',ZhangChunling’’,JiangFengying,,HeXizhong',XuWeilin,ZhangWanhua'。(1.AnimalHusbandryandVeterinaryResearchInstitute,ShanghaiAcademyofAgriculturalSciences,Shanghai201i06,China;

4、2.ShanghaiJiamuBiologicalsLimitedCompany,Shanghai201106,China:3.ShanghaiMunicipalAnimalInnocuousTreatmentCentre,Shanghai201415,China;4.ShanghaiCo—EliteAgriculturalSci—Tech(group)Co.Ltd.,Shanghai201106,China)Abstract:Inordertoensurethesafetyofthevaccineproduction,STcellsofdifferentgenerationwasidenti

5、fied.40gen—erationsofSTcellswasimportedfromChinaInstituteofVeterinaryDrugsControlandpassagedto8Ogenerations;3bottlesofeachgenerationtimeswerefrozentostorageinliquidnitrogen.Thecharacteristics,purityandkaryotype,tumorigenicityandcelltoxicityofthecellswerestudiedaftertherecoveryoffrozencells.Theresult

6、sshowedthatSTcelllinespresentedfusiformepithelialcellsandgrowthwell,withalmostanequalcellgrowthspeedamongdifferentgenerations..Bacteria,mold,mycoplasma,exogenousvirusdetectionwerenegative.Thechromosomenumberwas19pairsandkaryotypewasthesame.Notumorigenicityandnotoxicforguineapigsandrabbits.Thevirusin

7、theSTcelllinestablyreproduced,TCID50≥10,HI≥1:32.TheSTcellhankwasestablished.Itwasprovidedsecurityforthepigparvovirusvaccineproduction,andthebasisofthebasictheoryofthevaccineforthepigpseudorabiesvaccin

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