顺铂、依托泊苷、长春新碱、博来霉素对人卵巢颗粒细胞影响及其机制.pdf

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1、中国实用妇科与产科杂志2012年11月第28卷第11期·835·论著文章编号：1005—2216(2012)l1—0835—04顺铂、依托泊苷、长春新碱、博来霉素对人卵巢颗粒细胞影响及其机制曹金凤，郝红娟，王惠兰，张翠英摘要：目的比较顺铂、依托泊苷、长春新碱、博来霉素对人卵巢功能的影响。方法2010年3月至2010年l0月在中国人民解放军白求恩国际和平医院科研中心体外培养卵巢癌细胞株PA一1，加入不同浓度的顺铂、依托泊苷、长春新碱、博来霉素，作用48h后，M1丫r比色法测定其半数致死量(IC50)；体外受精一胚胎移植患者经阴道取卵获取人

2、卵巢颗粒细胞并进行体外培养，以上述四种药物半数致死量作用于人卵巢颗粒细胞，72h后MTT比色法测定人卵巢颗粒细胞活性；化学发光法测定颗粒细胞上清液雌二醇(E，)水平；免疫细胞化学法检测颗粒细胞Bcl-2、Bax的表达；流式细胞术测定细胞凋亡率。结果顺铂、依托泊苷、长春新碱、博来霉素杀伤PA一1细胞株的半数致死量分别为0．55m#L、1．67inL、1．8L、1．7mgL；除长春新碱外，上述3种药物其IC50均对人卵巢颗粒细胞的生长及分泌E，能力有明显抑制作用，以依托泊苷和博来霉素抑制作用最强，两者比较差异无统计学意义，顺铂次之，长春新碱

3、作用不明显；免疫细胞化学法结果显示，除长春新碱之外，其他3种药物IC50均使人卵巢颗粒细胞中Bcl一2表达下调，Bax表达上调。结论顺铂、依托泊苷、博来霉素对PA一1细胞株的IC50剂量均能促进人卵巢颗粒细胞凋亡并抑制E，的分泌，以依托泊苷和博来霉素作用最强，顺铂次之，而长春新碱作用不明显，其机制可能是通过下调Bcl-2、上调Bax的表达发挥其促凋亡作用。关键词：顺铂；依托泊苷；长春新碱；博来霉素；颗粒细胞；卵巢功能；细胞凋亡；雌二醇中图分类号：R737．31文献标志码：AAcomparisonoftheefectofcisplatin

4、．VP-16．vincristineandbleomycinonthefunctionofhumangranulosacel1．CAOfinng，HAOHong-juan，WANGHui—lan，ZHANGCui—ying．DepartmentofObstetricsandGynecology，Af-flictedSecondHospital，HebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050000，ChinaAbstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectofcisplatin

5、，VP一16，vincristineandbleomyeinonthefunctionofhumangranulosacel1．MethodsOvariancancercelllinePA一1wasinterferedwithcisplatin．VP一16．vincristineandbleomycinindifferentconcentrationfor48h．ThemedianlethaldosewasmeasuredbyMTT．Granulosacellswereobtainedfromin—fertilepatientsunde

6、rgoingIVF—ETcyclesandculturedinvitro．Culturedfor24h，thesecellswereinterferedwiththeme—dianlethaldoseoffonrdrugsabove．Afteranother72h．theviabilityofcellswasdetemlinedbyM1Tr．Theculturemedi—amwascollectedandtheestradiol(E，)1evelwasdetectedbychemiluminescencemethod．Usingimmu

7、m)cytochemicaltechnique，theexpressionofBcl-2，Baxongranulosacellwasobserved．ResultsItwasrevealedthattheconsecutiveIC50ofcisplatin，VP一16，vincristineandbleomycinwas0．55m#L，1．67m#L，1．8b~g／L，1．7mg／L．Wealsodemon—stratedthattheIC50ofcisplatin．VP一16andbleomycinexceptvincristinei

8、nhibitedthegrowthofhumangranulosecellsandreducedsecretionofE2．Immun0cytochemicaltechniquerevealedtheexp