三叉苦等5味中草药活性成分提取与抑菌性能研究.pdf

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1、第31卷第2期周口师范学院学报2014年3月VoI．31NO．2JournalofZhoukouNormalUniversityMar．2O14三叉苦等5味中草药活性成分提取与抑菌性能研究赵亚萍，赵锦慧，古红梅，张永亮(周口师范学院生命科学与农学学院，河南周口466001)摘要：采用煎煮法，对三叉苦等5味中草药组配的9个复方制剂进行活性成分提取，并通过测定抑菌率、抑茵圈大小、最小抑茵浓度和最小杀菌浓度等指标，研究其对大肠杆菌的体外抑菌效果．结果显示：各复方制剂的抑菌效果有明显差异，同一复方制剂的抑菌效果随浓度增加而增强，抑

2、菌效果与复方制剂中所舍的中草药种类多少并非呈正相关，而是由中草药种类及各种中草药之间的用量配比决定的．筛选出的对大肠杆菌抑制效果较好的复方制剂为三叉苦20g，白英20g，刺五加20g，半枝莲20g和三又苦15g，白英20g，刺五加1Og，龙葵2Og，半枝莲1Og．关键词：中草药；复方制剂；活性成分；抑茵性能；大肠杆菌中国分类号：R285．5文献标志码：A文章编号：1671—9476(2014)02—0119一O4近年来，随着饲料工业的飞速发展，虽然很多市同和堂大药店．人工合成的饲料添加剂如抗生素、调味剂、激素、防1．1．2

3、供试菌种腐剂、促长素等在饲料中普遍添加，对畜牧业的发大肠杆菌，由周口师范学院生命科学与农学学展起到了很大的促进作用，但其导致的负面效果如院提供．药物残留、抗药性及对人体等的毒副作用已经引起1．1．3培养基了国内外广大消费者和科研工作者的关注和忧虑．牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(营养琼脂培养基)、在目前的情况下，纯天然的中草药饲料添加剂以其营养肉汤培养基．具有安全特点、能预防动物疾病、改善畜禽产品质1．1．4实验器具量、提高畜禽产品产量而日益受到广泛关注，从而实验仪器：电子天平、高压蒸汽灭菌锅、数显电促进了中草药饲料添加剂的应用和

4、发展．关于三叉热培养箱、恒温振荡培养箱、干燥箱、超净工作台苦、白英、刺五加、龙葵、半枝莲等几味中草药，其单等．方抑菌作用研究有报道l1，但有关这几味中草低值易耗品：试管、培养皿、接种环、烧杯、量药的复方制剂抑菌性能研究鲜有报道．笔者通过测筒、滤纸、酒精灯、万用电炉、毫米刻度尺、砂锅、脱定抑菌率、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度脂棉等．(MBC)、抑菌圈大小等指标，对三叉苦等5味中草1．2方法药组配的9个复方制剂的抑菌性能进行研究，旨在1．2．1三叉苦等5味中草药复方制剂活性成分的为开发和利用中草药饲料抗菌添加剂提供理论

5、依提取据．方1：称取三叉苦2Og，白英20g，刺五加2O1材料与方法g；方2：称取三叉苦20g，白英2Og，龙葵20g；方1．1材料3：三叉苦20g，白英2Og，半枝莲2Og．3个配方中1．1．1中药材分别加入400mL的蒸馏水，文火加热煮沸1h，用三叉苦、白英、刺五加、龙葵、半枝莲，购于周口纱布过滤后得提取液，滤渣用4倍水量煎煮2次后收稿日期：2013—1l一12；修回日期：2013—12—12基金项目：周口师范学院2013年实验室开放项目(No．K201339)作者简介：赵亚萍(1991～)，女，河南周口人，周口师范学

6、院生命科学与农学学院生物科学专业学生．★通信作者：赵锦慧(1979一)，女，河南周口人，讲师，硕士，主要从事生物技术研究工作．120周口师范学院学报2014年3月弃去，将3次所得滤液混合并浓缩到6OmL，使提释度即是最小杀菌浓度．取液原液浓度达到1g／mL．方4：称取三叉苦2O1．2．7抑菌圈大小测定g，白英20g，刺五加20g，龙葵20g；方5：称取三采用药敏纸片法口测定各个复方中草药提叉苦20g，白英20g，刺五加20g，半枝莲20g；方取液的抑菌圈直径．将滤纸用打孔器制成6mm的6：称取三叉苦20g，白英20g，半枝

7、莲20g，龙葵小圆纸片，高压灭菌后放人1g／mL的各个复方中20g．同法制备，使提取液原液浓度达到lg／mL．草药提取液中，浸泡1～2h，制成药敏纸片，干燥方7：称取三叉苦15g，白英15g，刺五加15g，龙后备用，对照用无菌水浸泡．吸取0．1mL的菌悬葵15g，半枝莲15g；方8：称取三叉苦20g，白英液于平板中央，用玻璃涂棒将菌液均匀涂布于平板10g，刺五加10g，龙葵15g，半枝莲20g；方9：称上．含菌平板倒置干燥约30rain后，用无菌镊子取取三叉苦15g，白英20g，刺五加10g，龙葵20g，药敏纸片均匀贴在平

8、板上，每个平板贴3个药敏纸半枝莲10g．同法制备，使提取液原液浓度达到1片，每个处理做3个平板．20min后，将平板放入g／mL．37。C恒温培养箱中倒置培养18～24h．用毫米刻将上述各个配方所得提取液在121．3℃下高度尺测量抑菌圈直径，以3个平板的平均值表示抑压蒸汽灭菌20min后，4℃保存备用．