哈克尼西棉细胞质雄性不育系和保持系花发育不同时期mirl56及靶基因tbcc的研究

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1、棉花学报CoRonScience2013，25(6)：478~485哈克尼西棉细胞质雄性不育系和保持系花发育不同时期miR156及靶基因TBCC的研究裴文锋，吴建勇，邢朝柱，郭立平，戚廷香，王海林(中国农业科学院棉花研究所／棉花生物学国家重点实验室，河南安阳455000)摘要：本研究以棉花细胞质雄性不育系和保持系不同发育时期的花蕾为材料分析miR156和预测的靶基因TBCC(TublmbindingcofactorC)在花蕾中的表达水平及相互关系，并从棉花中克隆TBCC，探讨TBCC在棉花花粉发育过程中

2、的作用。结果表明，不育系和保持系花蕾中miR156表达量随花药发育进程而显著增加，TBCC的表达量在两材料花药发育不同阶段均存在显著差异，其中在保持系中随着花药发育逐渐降低，而在不育系中该基因的表达水平一直维持在较低水平，推测不育性状可能与TBCC的表达有关。克隆得到TBCC基因的eDNA全长序列，命名为GhTBCC(基因登录号KC488331)。其CDS长度为1713bp，编码570个氨基酸，分子量为62．79kD，含有保守的TBCC和CARP结构域。GhTBCC与杨树、蓖麻、拟南芥的氨基酸序列相似性

3、分别为81％、80％、77％。关键词：棉花；细胞质雄性不育；miR156；TBCC中图分类号：$562．035．3文献标志码：A文章编号：1002．7807(2013)06—0478．08MiR156anditsTargetGeneTBCCinFlowerDevelopmentCytoplasmicMaleSterileLineanditsMaintainerPEIWen-feng，WUJian—yong，X1NGChao—zhu*，GUOLi-ping，QITing—xiang，WANGHai—lin

4、(CottonResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,StateKeyLaboratoryofCottonBiology,Anyang455000，China)Abstract：ThisstudyaimedtoanalyzetheexpressionlevelandrelationshipbetweenmiR156anditstargetgeneTBCC(TubulinbindingCofactorC)inbudsofGossypiu

5、matdifferentdevelopmentalstageinacytoplasmicmalesterile(CMS)lineanditsmaintainerline，toclonethefull-lengthcDNAoftheTBCCgene，andtodeterminethepossibleroleoftheTBCCgeneinpollendevelopment．Real—timeRT—PCRshowedthattheexpressionlevelsofmiR156graduallyincreas

6、edwiththedevelopmentofpollenbetweentheCMSlineandthemaintainerline．TheexpressionofGhTBCCwasstrikinglycomplementarywiththeex—pressionofmiR156inthemaintainerline，butshowedverylowexpressionlevelsintheCMSline，whichdemonstratedthatTBCCisrelatedtomalesterility．

7、Thefull—lengthcDNAsequenceofTBCCwasclonedfromthebudsofthemaintainerline，andthegenewasnamedasGhTBCC．TheCDSofGhTBCCis1713bpandencodesapredictedproteinof570aminoacidswithapredictedmolecularweightof62．79kDa．ConservedTBCCandCARPdomainswereobservedinthepredict

8、edproteinse-quence．GhTBCCshowed81％，80％，and77％sequencesimilaritytotheTBCCproteinsequencesofPopuloustrichocarpa，Ricinuscommunis，andArabidopsisthaliana，respectively．Keywords：Gossypium；cytoplasmicmalesterility；miR156；TBCC在棉花胞质