鸡蛋清中卵转铁蛋白的分离提取研究.pdf

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1、河南农业科学，2014，43(3)：I58—160JournalofHenanAgriculturalSciences鸡蛋清中卵转铁蛋白的分离提取研究傅冰，季秀玲，俞汇颖。，魏云林。，郑维桃。(1．丽水职业技术学院环境丁程学院，浙江丽水323000；2．昆明理T大学生命科学与技术学院云南昆明650500；3．丽水绿谷食品有限公司，浙江丽水323000)摘要：为了研究鸡蛋清中卵转铁蛋白的分离提取工艺，采用硫酸铵沉淀和离子交换层析分离卵转铁蛋白，用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)检测其纯度。鸡蛋清原液用Tris—HCl缓冲液稀释5倍，4℃下静置6h以上，采用5O～80硫酸铵分级沉淀

2、和Q—SepharoseFF离子交换层析分离卵转铁蛋白。结果显示，分离提取的卵转铁蛋白纯度达到96，回收率为88．639／6，且其具有生物活性，对大肠杆菌的抑菌率为48．84。表明采用硫酸铵分级沉淀和Q—SepharoseFF离子交换层析法分离鸡蛋清中卵转铁蛋白可行。关键词：鸡蛋清；卵转铁蛋白；分离提取；离子交换层析中图分类号：T$253．9文献标志码：A文章编号：1004—3268(2014)03—0158—03PreliminaryStudyontheSeparationof()v0transferrinfromEggWhiteFUBing，JIXiu—ling，YUHui—yi

3、ng，WEIYun—lin，ZHENGWei—tao(1．BranchofEnvironmentEngineering，LishuiVocational＆．TechnicalCollege，Lishui323000，China；2．FacultyofLifeScienceandTechnology，KunmingUniversityofScienceandTechnology，Kunming650500，China；3．LishuiGreenValleyFoodCo．Ltd．，I．ishui323000。China)Abstract：Tostudyseparationprocessi

4、ngofovotransferrinfromeggwhiteproteins，ovotrans—Ierrinwasseparatedbyammoniumsulfatesandanion—exchangechromatography．PurityofOVO—transferrinwasassayedbysodiumdodecylsulfate—polyacrylamidegelelectrophoresis(SDS—PAGE)．DilutedeggwhitewithfivetimesvolumeofTrisHC1buffersolution，depositedforatleast6ho

5、ursat4℃，wastreatedbyfractionalprecipitationwithammoniumsulfate(from50to8O)andQ—SepharoseFFanion—exchangechromatography．ItshowedthatthepurityofOVO—transferrinwas969／6bySDS—PAGEdetection，therecoverywas88．639／6，andhacteriostasisrateagainstE．coliwas48．84．AmmoniumsulfateprecipitationandQ—SepharoseFF

6、ionexchangechromatographywasfeasibletoseparateovotransferrinfromeggwhite．Keywords：eggwhite；ovotransferrin；separation；anion—exchangechromatography蛋清中含有大量的生物活性蛋白质，其中卵白蛋白同属于转铁蛋白家族。OVT是具有许多特殊蛋白、卵转铁蛋白、溶菌酶是蛋清中3种主要的生物生理活性的天然糖蛋白，属于免疫活性蛋白，具有抗活性蛋白质。我国是鸡蛋生产大国，但鸡蛋的深加菌及免疫功能，其最常见的功能是运转铁离子，能够工层次较低。将细胞外的铁离子运输到

7、红细胞中，供合成血红蛋卵转铁蛋白(ovotransferrin，OVT)也称为副卵白。OVT可与病原微生物竞争其赖以生存的铁离白蛋白或卵伴白蛋白，是禽蛋清中的一种主要蛋白，子，或与其受体结合阻断铁吸收途径，使细菌因缺乏约占鸡蛋清的12，分子量70～78kD。OVT是一铁源而生长受抑制，也可通过去极化在膜上形成孔种更易溶的非结晶性白蛋白，与血清转铁蛋白、乳铁洞破坏细菌细胞膜，杀死细菌。OVT具有抗病毒性收稿日期：2013—10—16基金项目：丽水市科技局校企