广适性转bar基因大豆除草剂草丁膦筛选浓度的研究-论文.pdf

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1、第32卷第6期大豆科学Voll32NO．62013拄12月SOYBEANSCIENCEDec．20l3广适性转bar基因大豆除草剂草丁膦筛选浓度的研究厉志，王曙明，刘佳，孟凡梅，衣志刚，董志敏(1．吉林省农业科学院大豆研究所，吉林长春130033；2．国家大豆工程研究中心，吉林长春130033)摘要：草丁膦作为转基因筛选剂具有高效、快速、简便等优点。为了提高筛选转基因大豆阳性植株的效率，以6个常用的转基因受体大豆品种为材料，在温室和田间，采用叶片涂抹和整株喷施两种方法，通过受体品种叶片颜色变化和致死浓度确定了转基因后代

2、材料适宜筛选浓度，其中适宜涂抹浓度为100～150mg·L～，适宜喷施浓度为700～750mg·L～。以转bar基因T代大豆植株进行验证，筛选浓度筛选准确率分别达到61．3％和73．9％。本研究为抗草丁膦转基因大豆后代材料的筛选提供了重要依据。关键词：bar基因；转基因大豆；除草剂；草丁膦；筛选中图分类号：S482．4文献标识码：A文章编号：1000-9841(2013)06-0810-04StudyonScreeningConcentrationofWideAdaptabilityHerbicide-Resistan

3、tbar-TransgenicSoybeanLlzhi，WANGShu．ming，LIUJia，MENGFan—mei，YIZhi—gang，DONGZhimin，(1．SoybeanResearchInstitute，JilinAcademyofAgricuhuralSciences，Changehun130033，China；2．NationalEn~neefingResearchCenterforSoybean，Changchun130033，China)Abstract：Glufosinateprovestob

4、eeffectiveandconvenientinscreeningtransgenicsoybeanplants．Toimprovethescreeningefficiencyoftransgenicpositiveplants，theglufosinatescreeningconcentrationsweredeterminedbytwomethods(daubingandspraying)inthegreenhouseandfield，withsixcommonsoybeantransgenicreceptorv

5、arietiesasmaterials．Thesuitableglufosi—natescreeningconcentrationsfordaubingandsprayingwere100—150and700-750mg·L一，respectively，whendeterminedbyleavescolorchangesandmortalityrateofsoybeanplants．ThentheavailabilitywastestedbyTlplantsofsoybeantransgeniclineswithbar

6、gene。theaccuracyratewas61．3％and73．9％．respectively．Theresultswouldfacilitatethescreeningofglufos·inate-resistanttransgenicsoybeanprogenies．Keywords：bargene；Transgenicsoybean；Herbicide；Glufosinate；Screening草丁膦作为转基因材料筛选剂，具有高效、快1材料与方法速、简便等特点，被广泛应用于转基因研究中。目前，草丁膦筛选转基因

7、大豆后代材料，通常采用萌1．1材料芽法、叶片涂抹法以及喷施法等。而不同作物、不供试大豆品种为华春6号、小粒豆1号、吉育同筛选方法使用草丁膦的浓度存在较大差异¨。73、吉育89、黑农38和铁丰29；用于验证筛选浓度大豆转基因后代材料的筛选主要是在真叶和的花粉管通道法转化获得的Tn代种子11086粒，其三出复叶两个时期进行涂抹或整株喷施。卢涛中涂抹法5405粒，喷施法5681粒；等研究认为，135mg·L草丁膦叶片涂抹可用于除草剂为草丁膦，由日本明治制药株式会社生转基因大豆植株的大规模筛选。李永光等_6研究产；bar基因试

8、纸条购自EnviroLogix，bar基因检测表明，8O和120mg·L分别为叶片涂抹和全株喷引物：施时筛选转基因和非转基因大豆的适宜草丁膦BAR—F：5．ACAAGCACGGTCAAC1rCC_3浓度。BAR．R：5．ACTCGGCCGTCCAGTCGTA．3本研究以6个常用的转基因受体为材料，通过1．2试验设计设定不同的浓度梯